Sida 1( 5) Riskbedömning Coomassie-infärgning av gel Utförd 2014-09-15 Av Charlotte Welinder på Bo Baldetorps grupp. Andrad senast 2014-09-19 Av Lars Ekblad Slutlig bedömning av hela metoden 1. Acceptabel risk 1. Ange vilka lokaler bedömningen avser KAMPRADHUSET Våning Rum Plan 11 11-29 Plan 13 13-24 lab 2. Metodbeskrivning/Aktivitet För att visualisera proteiner som körts med elektrofores på akrylamid gel (SDS-PAGE) behövs en infärgning. Det finns ett antal beskrivningar på olika metoder för detta. Många färdiga kit finns även att köpa på marknaden. Vilken metod man bör välja för ett specifikt försök kan variera beroende av vilken typ av proteiner man har, kvantiteten och efterföljande experiment. Coomassie Brilliant Blue (CBB, R250, R350 m.m.) färgar proteinerna blå (kan skifta i violett, rött -metakromisk effekt) och har en detektions gräns på ca 100ng (1cm band). Vissa proteiner färgas ej in med CBB. Mekanismen för CBB inbindningen till proteiner är okänd, men indikationer finns att det binder in till positiva laddningar på proteinet. Detta skulle förklara att inbindningsförmågan kan skifta mellan olika proteiner. Efter avfärgning (tillräckligt länge i avfärgningslösning, d.v.s. 1 dag upp till 2 veckor) går det bra att färga med silver. Gelen läggs i en plastlåda med 30% etanol och 10% ättiksyra (lösning 1). Efter 1 timme byts lösningen till en färglösning innehållande 0,02% w/v i lösning 1. Efter ca 2 h avfärgas gelen med lösning 1 tills att proteinbanden syns. 3. Produktlista Produktnamn Konc. Form Mängd Fara Kommentar Coomassie Tablets, PhastGel Blue R-350 Etanol 30-70% CLP-information H226 P210, P243, P261, P280, P403 + P233 Äldre riskinformation R10 S16, S7 Listor brandfarlig vara Organiska lösningsmedel Tablett Vätska Ja, halten luftföroreningar i inandningsluften av ämnet vid beskriven hantering är godtagbar utifrån gränsvärdet i AFS 2011:18. Mätning bedöms inte vara nödvändig. Etanolen späds med destillerat vatten till 30%.
Sida 2( 5) Ättiksyra 99,8% (glacial) vattenfri CLP-information H226, H314 P280, P301 + P330 + P331, P305 + P351 + P338 Äldre riskinformation R10, R35 S23, S26, S45 Listor brandfarlig vara Organiska lösningsmedel Vätska Faroangivelser H226 H314 Brandfarlig vätska och ånga. Orsakar allvarliga frätskador på hud och ögon. Skyddsangivelser P210 P243 P261 P280 P301 + P330 + P331 P305 + P351 + P338 P403 + P233 Får inte utsättas för värme, heta ytor, gnistor, öppna lågor och andra antändningskällor. Rökning förbjuden. Vidta åtgärder mot statisk elektricitet. Undvik att andas in damm/rök/gaser/dimma/ångor/sprej. OBSERVERA! Skyddsangivelsen kräver specificering av leverantör/tillverkare, för exakt formulering se säkerhetsdatabladet. Använd skyddshandskar/skyddskläder/ögonskydd/ansiktsskydd. OBSERVERA! Skyddsangivelsen kräver specificering av leverantör/tillverkare, för exakt formulering se säkerhetsdatabladet. VID FÖRTÄRING: Skölj munnen. Framkalla INTE kräkning. VID KONTAKT MED ÖGONEN: Skölj försiktigt med vatten i flera minuter. Ta ur eventuella kontaktlinser om det går lätt. Fortsätt att skölja. Förvaras på väl ventilerad plats. Förpackningen ska förvaras väl tillsluten. Riskfraser R10 R35 Brandfarligt. Starkt frätande. Skyddsfraser S16 S23 S26 S45 S7 Förvaras åtskilt från antändningskällor - Rökning förbjuden Undvik inandning av gas/rök/ånga/dimma (lämplig formulering anges av den som släpper ut produkten på marknaden) Vid kontakt med ögonen, spola genast med mycket vatten och kontakta läkare Vid olycksfall, illamående eller annan påverkan, kontakta omedelbart läkare. Visa om möjligt etiketten. Förpackningen förvaras väl tillsluten 4. Kemikaliernas inneboende risk b: Hög risk 5. Exponeringsnivå Måttlig 6. Skyddsventilation Skyddsnivå 2 - dragskåp e.d.
Sida 3( 5) 7. Biologiskt material Ej relevant 8. Kommentarer till Biologiskt material 9. Eventuellt samverkande effekter och möjliga reaktioner 10. Kommentar till Eventuellt samverkande effekter och möjliga reaktioner 11. Krav på lokal och utrustning i lokal Ej relevant 12. Kommentarer till Krav på lokal och utrustning i lokal 13. Specificering av förvaring Ventilerat skåp 14. Kommentarer till Förvaring 15. Får ej förvaras tillsammans med. Baser, Lättantändligt material 16. Kommentarer till Får ej förvaras tillsammans med Lättantändligt material gäller etanol och ättiksyra. Baser gäller ättiksyra. 17. Krav på skyltning Kemikalier 18. Kommentarer till Krav på skyltning 19. Personlig skyddsutrustning Skyddsglasögon/visir, Skyddshandskar, Skyddsrock 20. Kommentarer till Personlig skyddsutrustning 21. Beskriv teknisk utrustning
Sida 4( 5) 21. Beskriv teknisk utrustning 22. Yttre miljö Utsläpp till luft 23. Kommentar till Yttre miljö Etanol och ättiksyra avdunstar. Vi bedömer mängderna som försumbara. 24. Avfallshantering Skärande/stickande/smittförande avfall 25. Kommentarer till Avfallshantering Coomassielösningen samlas upp i en plastburk som placeras i dragskåp, där färgen får torka in. Därefter slängs burken i Skärande/stickande/smittförande avfall. 26. Första hjälpen samt beredskap inför olycka, brand och spill Förstahjälpentavla, Nöddusch, Ögondusch, Absorberande ämne 27. Kommentarer till Första hjälpen samt beredskap inför olycka, brand och spill 28. Arbetsmoment och omständigheter som är riskfyllda Överföring mellan kärl, Blandning, Ej relevant 29. Kommentarer till Arbetsmoment och omständigheter som är riskfyllda Hanteringen vid blandning och överföring mellan kärl sker i dragskåp. Riskerna är då väldigt små. 30. Särskilda instruktioner till annan personal 31. Slutlig bedömning av hela metoden 1. Acceptabel risk 32. Kommentarer Slutlig bedömning samt ytterligare riskbegränsande åtgärder 33. Deltagande personer i riskbedömningen Charlotte Welinder, Lars Ekblad, Eva Lindqvist
Sida 5( 5) Signatur Ansvarig chef Datum Lars Ekblad Datum för nästa bedömning: 2019-09-19