ScanGel Monoclonal ABO/RH1/K Gelkort Gelkort

Transkript

1 ScanGel Monoclonal ABO/RH1/K Gelkort Gelkort GELER TILLVERKADE MED MONOKLONALA REAGENS AV MURINT ELLER HUMANT URSPRUNG Påvisande av Ag : ABO1, ABO2, RH1, KEL1 IVD Alla tillverkade och marknadsförda reagens ingår, från mottagande av råmaterial till slutlig marknadsföring av produkten, i ett komplett kvalitetssystem. Varje batch undergår kvalitetskontroll och släpps inte ut på marknaden förrän den följer satta kriterier för acceptans. Dokumentation tillhörande produktion och kontroll av varje enskild batch finns tillgänglig på vårt företag. 53

2 I - TESTETS ANVÄNDNING OCH PRINCIP Detta kort är avsett att användas i fackmässigt och in vitro diagnostiskt bruk. Utformat för bestämning av antigen ABO1 (A), ABO2 (B), RH1 (D) och KEL1 (K). testet kombinerar principerna för agglutination och gelfiltrering. Reaktionen erhålls och avläses efter centrifugering av specialtillverkade mikrorör innehållande gel behandlad med det reagens som är specifikt för det erytrocyt-antigen som skall bestämmas. Suspensionen av röda blodkroppar fördelas i varje mikrorör varefter gelkortet omedelbart centrifugeras. Icke agglutinerade erytrocyter samlas i botten av mikroröret medan agglutinat fastnar högre upp i mikrorörets gel, beroende på agglutinatets storlek. Positionen i mikrorörets gel avgör reaktionens intensitet II - KARAKTERISTIKA FÖR REAGENSEN De två första mikrorören på ScanGel Monoclonal ABO/RH1/K gelkort innehåller en gel behandlad med murint monoklonalt reagens specifikt för anti-ab01 (A) respektive anti-ab02 (B). Dessa antikroppar produceras från följande kloner : anti-ab01 (A) : 15750F7 anti-ab02 (B) : X9 Det tredje och det fjärde mikroröret innehåller båda en gel behandlad med humant monoklonalt reagens specifikt för anti-rh1 (D) : Antikroppen i det tredje mikroröret är en IgM-antikropp producerad av klonen B9A4-B2A6A6A1A1 Antikroppen i det fjärde mikroröret är en IgG-antikropp producerad av klonen H2D5D2F5 Dessa två anti-d reagens medger inte detektion av fenotypen partiell RH1 kategori VI (D VI ). Det femte mikroröret innehåller en gel behandlad med humant monoklonalt reagens specifikt för anti-kel1 (K). Denna antikropp är en IgM-antikropp producerad av klonen MS 56. Det sjätte mikroröret innehåller en antikroppsfri gel och är ett kontrollrör (Ctl). Dessa reagens innehåller natriumazid (< 0,1 %) som konserveringsmedel. Artikelnummer och antalet gelkort per förpackning anges på förpackningens etikett. 54

3 III - FÖRVARING OCH HÅLLBARHET Information om hållbarhet och förvaring anges på förpackningen. Förvara gelkorten i rumstemperatur (+15 C C). Lagra gelkorten vertikalt och skyddade från värmekällor i ett utrymme med relativt konstant temperatur och fuktighet. IV - VARNINGAR OCH FÖRSIKTIGHETSÅTGÄRDER Resultatens tillförlitlighet är beroende av att god laboratoriesed (GLP) följs : Använd inte reagenser efter utgångsdatum angivet på etiketten. Använd inte kort som visar tecken på uttorkning, bubblor eller synliga skador. Då reagensen ingående i mikrorören är olika är det viktigt att iaktta försiktighet för att undvika kontaminering mellan rören. Detta gäller speciellt vid avlägsnandet av den skyddande aluminiumremsan samt vid distribuering av prov. Använd en ny pipettspets för varje prov. Kontrollera precisionen och den allmänna funktionsdugligheten för pipetter och annan utrustning. Använd handskar och skyddsglasögon vid hantering av reagens och prover. Munpipettera aldrig. Undvik spill och stänk. Vid spill eller stänk, rengör med 12 % klorin, utspädd 1/10 och torka med absorberande papper. Allt material använt vid rengöring skall placeras i en behållare för riskavfall. Förbrukningsvaror och produkter som har varit i kontakt med prov eller reagens innehållande material av humant ursprung skall destrueras efter dekontaminering. Säkerhetsföreskrifter finns att erhålla vid förfrågan. V - PROVHANTERING Blodprovtagning skall ske aseptiskt i ett rör med eller utan antikoaguleringsmedel (EDTA, CPD). Analysen skall utföras så snart som möjligt efter provtagningen. Prov som inte kan analyseras snabbt bör förvaras förvaras i en temperatur på +2 C - +8 C och skall analyseras inom 48 timmar. Under inga omständigheter får hemolys vara synlig. Värm inte proverna. 55

4 VI - METOD Tillhandahållet materiel ScanGel Monoclonal ABO/RH1/K gelkort Övrigt, icke tillhandhållet, nödvändigt material Spädningsreagens för erytrocyter ScanLiss 100 ml ScanLiss 500 ml ScanSol 100 ml ScanSol 500 ml IH QC : Kontroll av blodgruppsserologi IH QC 4 x 6 ml Centrifug : ScanGel Centrifuge Automatiska eller semiautomatiska pipetter Pipettspetsar Engångsrör Avfallsbehållare för riskavfall Klorin (eller motsvarande) Latexhandskar Absorberande papper Skyddsglasögon Kontroller Positiva och negativa kontroller : kända positiva och negativa erytrocyter för den antigen som testas, analyseras parallellt med patientproven för att validera reagensens funktion. IH QC : Kontroll av blodgruppsserologi. Procedur Följ noggrant proceduren. Tillåt reagensen uppnå rumstemperatur före användning. Separera genom centrifugering serum eller plasma från erytrocyterna i provet. VI.1 - Suspension i ScanLiss a) Bered en suspension av 1% erytrocyter direkt före analys i ScanLiss Överför 1 ml ScanLiss i ett märkt engångsrör. Tillför 10 μl av erytrocytpelleten. Blanda. Erytrocytsuspensionen är färdig att användas. 56

5 b) Metod 1. Märk gelkortet med provnamn eller nummer. För att undvika kontaminering mellan gelkortets mikrorör ska aluminiumremsan försiktigt avlägsnas från gelkortet. Resuspendera erytrocyterna före användning. 2. Pipettera 50 μl erytrocytsuspension i varje mikrorör på gelkortet. 3. Centrifugera sedan i 10 minuter i ScanGel-centrifugen. 4. Avläs reaktionerna. VI.2 - Suspension i ScanSol a) Bered en suspension av 5% erytrocyter i ScanSol direkt före analys Överför 0,5 ml ScanSol i ett märkt engångsrör. Tillför 25 μl av erytrocytpelleten Blanda. Erytrocytsuspensionen är färdig att användas. b) Metod 1. Märk gelkortet med provnamn eller nummer. För att undvika kontaminering mellan gelkortets mikrorör skall aluminiumremsan försiktigt avlägsnas från gelkortet. Resuspendera erytrocyterna före användning. 2. Tillsätt 10 μl erytrocytsuspension till varje mikrorör i gelkortet. 3. Centrifugera omedelbart 10 minuter i ScanGel Centrifuge. Tiden mellan slutförande av pipetteringen och påbörjande av centrifuringen får ej överskrida 10 minuter. 4. Avläs reaktionerna. VII - RESULTAT OCH TOLKNING Närvaro av agglutinat på ytan av, eller i, gelen påvisar ett positivt resultat som indikerar närvaro av motsvarande erytrocytantigen. En pellet av röda blodkroppar i botten på mikroröret påvisar ett negativt resultat som indikerar att motsvarande erytrocytantigen inte har detekterats. En positiv reaktion i ett av mikrorören kan endast utvärderas om kontrollröret (Ctl) ger en negativ reaktion. Om kontrollröret ger en positiv reaktion : Tvätta de röda blodkropparna i en isotonisk saltlösning (NaCl 0,9%) Upprepa förfaringssättet som beskrivits i VI.1 eller VI.2. Om kontrollröret (Ctl) fortfarande visar en positiv reaktion så kan de reaktioner som erhölls med ScanGel Monoclonal ABO/RH1/K gelkort inte tolkas. 57

6 Gör om testet i en annan teknik än gelfiltrering. Om kontrollröret ger en negativ reaktion tolkas de övriga mikrorören på följande sätt : Positivt resultat Svagt positivt resultat Negativt resultat till Resultaten kan endast utvärderas om de positiva och negativa kontrollerna ger förväntade resultat. a) Tolkning av mikrorören ABO1(A) och ABO2 (B) Ett positivt resultat i mikrorör ABO1 (A) indikerar närvaro av ABO1 (A) antigen på de testade erytrocyternas yta. Ett positivt resultat i mikrorör ABO2 (B) indikerar närvaro av ABO2 (B) antigen på de testade erytrocyternas yta. En komplett ABO gruppering kräver obligatoriskt att 2 komplementära test utförs : direkttestet utfört med anti-ab01 (A), anti-abo2 (B) och om nödvändigt, anti-abo3 (AB) reagens och konfirmationtest utfört med testerytrocyter. Erytrocyt- och serumtestens resultat måste vara samstämmiga. Avvikelser mellan dessa två test måste kontrolleras och lösas innan fastställande av resultatet för ABO-grupperingen. När resultaten mellan erytrocyt- och serumtesten avviker skall kompletterande test med lämpliga kontrollprov utföras. b) Tolkning av mikrorören RH1 (D) Ett positivt resultat i minst ett av mikrorören RH1 (D) påvisar närvaro av antigen RH1 (D) på de röda blodkropparnas yta. Ett negativt resultat i ett av mikrorören, och en positivt resultat i det andra, kan vara förenad med närvaron av RHW1 (svaga D) antigen eller en variant av RH1 antigen. Utför en kompletterande test med ScanGel Monoclonal Anti-RH1 (D)/RHW1 reagens och ScanGel COOMBS Anti-IgG,-C 3d gelkort. c) Tolkning av mikrorör KEL1 (K) Ett positivt resultat i mikrorör KEL1 (K) påvisar närvaro av KEL1 (K)- antigen på de testade erytrocyternas yta. 58

7 VIII - PRESTANDA ScanGel Monoclonal ABO/RH1/K prestanda har evaluerats med en panel av oselekterade prov från blodgivare, patienter, och nyfödda, och även på en panel av selekterade prov. Varje resultat har jämförts med resultaten erhållen i slides, rör, mikroplatta eller gelfiltrering. a) Specifika prestanda för anti-abo1(a) och ABO2 (B) reagens Anti-ABO1 (A) och anti-abo2 (B) har evaluerats med en panel bestående av 1641 oselekterade prov från 1150 blodgivare, 332 patienter och 159 nyfödda, samt med en panel bestående av selekterade prov (svaga antigen). De 1641 proven gav alla resultat i överensstämmelse med förväntade resultat. En panel bestående av 17 selekterade prov (Ax, B3, AxB, Bh, CisAB, A3B, ABf) har testats. Alla prov detekterades med en reaktivitet på 1+ till 3+. De testade förvärvade B-antigenen detekterades ej anti-abo2 (B) på ScanGel Monoclonal ABO/RH1/K gelkort. Anti-ABO1 (A) och anti-abo2 (B) på ScanGel Monoclonal ABO/RH1/K gelkort visade en god reproducerbarhet i både inom serie och mellan serieanalyser. b) Specifica prestanda för anti-rh1 (D) reagens Anti-RH1 (D), klon B9A4, har evaluerats med en panel bestående av 1641 oselekterade prov från 1150 blodgivare, 332 patienter och 159 nyfödda, samt med en panel bestående av 24 selekterade prov (svaga Ag, varianter och särskilda fenotyper). De 1641 proven gav alla resultat i överensstämmelse med förväntade resultat. 94% av de testade RHW1 (svaga D) antigenen detekterades. Alla varianter och särskilda fenotyper detekterades, med undantag för ett prov av fenotyp RH1 partiell kategori VI (D VI ). Anti-RH1 (D) reagens från klon H2D5D2F5 har evaluerats med en panel bestående av 1444 oselekterade prov från 1121 blodgivare, 292 patienter och 26 nyfödda samt 5 frusna prov. Panelen inkluderade 21 RHW1 (svaga D) antigen och 5 RH1 (D) varianter inklusive RH1 partiell kategori VI (D VI ). De 1444 proverna har visat reslutat som överensstämmer med de förväntade. De 3 testade proven av fenotyp RH1 partiell kategori VI (DVI) har ej detekterats. Båda reagensen anti-rh1 (D) ingående i ScanGel Monoclonal ABO/RH1/K gelkort visar en god reproducerbarhet i både inom serie och mellan serieanalyser. 59

8 c) Specifica prestanda för anti-kel1 (K) reagens Anti-KEL1 (K) har evaluerats med 1519 oselekterade prov från 1150 blodgivare, 332 patienter och 37 nyfödda, samt med en panel bestående av 5 frysta erytrocyter. Alla prov gav alla resultat i överensstämmelse med förväntade resultat. Anti-KEL1(K) reagenset ingående ScanGel Monoclonal ABO/RH1/K gelkort visar en god reproducerbarhet i både inom serie och mellan serieanalyser. BEGRÄNSNINGAR Abnormala resultat kan orsakas av : bakteriell eller kemisk kontaminering av serum, plasma, röda blodkroppar eller utrustningen. medicinering eller sjukdom hos patienten orsakande korsreaktion. en erytrocytsuspension avvikande från den rekommenderade. närvaro av fibrin (en kompakt pellet av celler i botten av mikroröret tillsammans med ett tunt, rosa band, skapad av erytrocyter som kvarhålls av fibrinrester, på toppen av gelen). användning av en icke rekommenderad suspensionsvätska till de röda blodkropparna. kontaminering mellan mikrorören. användning av andra procedurer än den ovan beskrivna. Under licens frå DIAMED SA, 1785 Cressier-sur-Morat, Schweiz 60

9

10 Bio-Rad 3, bd Raymond Poincaré Marnes-la-Coquette - France Tél.: /2008 Fax.: Code: