LABORATORIEMEDICIN VÄRMLAND

Transkript

1 Dokumenttyp: Metodbeskrivning TM Disciplin: Transfusionsmedicin Status: Ackrediterad Kapitel: LABORATORIEMEDICIN VÄRMLAND Blodgruppsserologi Dokumentägare: Maria Andersson Dokumentnr: BJON-54UGJE Version: 10 Revisionsdatum: Beredningsnivå: Signerad av: Datum: Giltighetsdatum: Författare Maria Andersson Metodansvarig Maria Andersson Kvalitetsgranskare Medicinskt ansvarig Fastställare Elisabet Olsson Per-Olof Forsberg Per-Olof Forsberg BAS-test med gelteknik - manuell Ändringar sedan senaste revision : Ändrat behörighet till blodgruppsserologi, nivå II. <br>tagit bort under "Bra att veta": Om patient tillhör blodgrupp RhD negativ men har transfunderats med RhD positiva erytrocyter, ska BAS-testen kompletteras med DAT under 3 månader. Trivialnamn och koder BAS-test (Blodgruppskontroll och AntikroppsScreening) Labgrupp 6 = BAS-test, Labtyp 8 = BAS-test Definition I BAS-test ingår: - ABO kontroll av förprovet och jämförelse med tidigare registrerad ABO grupp i databas. Detta för att upptäcka prov- eller patientförväxling. - Förfinad antikroppsscreening med särskilt utvald panel av testerytrocyter. - Datoriserad kontroll vid utlämning av blodkomponent. Till skillnad från serologisk förenlighetsprövning (traditionell korstest) ingår ej test mot varje enskild erytrocytenhet (MG-test). Användningsområde och princip BAS-test är den förenlighetsprövning (inför transfusion av erytrocyter) som används när patient inte har kända irreguljära antikroppar mot erytrocytantigen. Kolonnagglutination används: - ABO-kontroll: Antigen på erytrocyter påvisas med kända testreagens i direkt agglutinationsteknik. - Antikroppsscreening: Antikroppar i serum/plasma påvisas med kända testerytrocyter i indirekt antiglobulinteknik. Behörighet Behörighet för blodgruppsserologi, nivå II. Provtagning och provhantering Förberedelse av patient Provtagning enl Acceptans, inmärkning och registrering av prov. Provmaterial och provtagningsrör Serum/plasma och erytrocyter Provtagningsrör och tillsatser enligt Förberedande åtgärder - Blodgruppsserologiska undersökningar. Provberedning och förvaring Provet får vara högst 2 dygn gammalt (provtagningsdygnet = dag 1 och nästa dag = 2). Centrifugering ska ske inom 5 timmar före laboration. Centrifugera om provet om tidpunkten för centrifugeringen är osäker. - Prov utan tillsats: Minst 10 minuter /8

2 - Prov med tillsats av EDTA: Minst 5 minuter Analyserat prov förvaras minst en vecka i kylskåp. Reagens/Tillsatslösningar Gelkort, DiaClon BAS-test IgG Testerytrocyter, BI-BIV, panel för BAS-test enl bilaga, spädning enl Beredning av testerytrocyter. ID-Cellstab - enligt reagens- och materieldokumentation i Material Fabrikat och användningsområde och Testreagens Fabrikat och användningsområde. Kontrollmaterial Intern kontroll Utförs en gång per dygn samt när nytt rör/flaska med testerytrocyter påbörjas och protokollförs på lista Metodkontroll- BAS-test, här anges också gelkortets batchnummer samt datum för testerytrocyternas totala hållbarhetstid, 30 dygn. Vid förväntade reaktioner godkänns kontrollerna genom signering av protokollet. Kontroll av antihumanserum: Kontrollreagens = anti-fy a Kontroll av anti-a och anti-b: i samband med BAS-test på patient jämförs resultatet med tidigare grupperingsresultat i databas. Ankomstkontroll av anti-a, anti-b och antihumanserum utförs vid leverans enl Ankomstkontroll av testreagens. Varje enskilt rör med bruksfärdig testerytrocytsuspension kontrolleras vid uppspädningstillfället, se Beredning av testerytrocyter. Protokoll förvaras i pärm Kontroller beredning. Extern kontroll Enl Externa kontrollprogram, förteckning För resultat och uppföljning; Se pärm märkt Equalis-blodgruppsserologi Se pärm märkt Regional serologisk kvalitetskontroll Apparatur och övrigt materiel Gelkortscentrifug Värmeinkubator för 37 O C - enligt aktuell inventarieförteckning Pipett, automat 10 µl 250 µl Pipett, 10 µl µl Alternativ pipett vid blodsmitta - enligt aktuell pipettförteckning Fast ställ, BAS-testbricka Etiketter; labnummerserie 6 för inmärkning av provrör och blodbeställningssedel/remiss Plaströr 12 x 50 mm Engångspipetter - enligt aktuell materieldokumentation Förberedande åtgärder, märkning och registrering av prov - För godkännande och regler för registrering av prov, se instruktion Acceptans, inmärkning och registrering av prov. - Dokumentera byte av batch-/lotnummer i reagensförteckningen. enl. instruktion Dokumentation av testreagens. - Kontrollera via P000: att blodgruppsuppgift finns. Utför gruppering om blodgruppsuppgift saknas i databas. att blodbeställningssedeln är från senaste blodgrupperingen. Om så ej är fallet, tag ut en ny och fäst ihop med inkommande beställningssedel. aktuell information i skärm. - Rensa inaktuell information i skärm via P Om remiss har använts, tag ut blodbeställningssedel via P000 och häfta ihop denna med inkommande remiss /8

3 - Granska gelkort visuellt: Buffert ska finnas över gelen, som inte får innehålla några luftbubblor. Endast godkända kort för användas. - Placera provrör och gelkort på BAS-testbrickan tillsammans med tomt plaströr avsett för blodgruppskontroll. Placera provrör och gelkort mitt för varandra i samma rad på BAS-testbrickan. - Märkning och registrering: Märk blodbeställningssedel/remiss, provrör och gelkort med labnummeretikett. Remissregistrera via P533 och välj BAS-test. Läs in labnummer och provtagningsdatum från inkommande remiss. Sätt en bock i rutan "Skriv protokoll" för utskrift av BAS-test protokoll. Kontrollera provröret en gång via P532. Utförande Reagens och prov bör ha rumstemperatur. För att uppnå rätt suspensionsstyrka, ska samtliga i laborationen ingående suspensioner vara välblandade. Jämför med referenssuspension vid tvekan. Normalfall 1. Överför 50 µl av testerytrocyter BI - BIV till resp. position på gelkortet. 2. Tillsätt 25 µl patientserum/plasma till de fyra positionerna med testerytrocyter. Kontrollera att laborationsnummer på provrör och gelkort överensstämmer. 3. Bered en 1,0 % suspension av patienterytrocyter: Dispensera 1,0 ml ID-Cellstab till plaströret för blodgruppskontroll. Rör med EDTA-tillsats: tillsätt 10 µl patienterytrocyter till suspensionsröret. Rör utan tillsats: tillsätt patienterytrocyter med engångspipett. Koncentrationen ska i båda fallen justeras. Jämför med referenssuspension vid tvekan. 4. Överför 50 µl suspenderade patienterytrocyter till positionerna för anti-a och anti-b. 5. Inkubera 15 minuter i 37 O C. 6. Centrifugera. Blodsmitta Om prov är märkt med Blodsmitta : Märk allt ingående materiel i laborationen med blodsmitteetikett. Använd alt pipett och utför laborationen på riskbricka. Förslut använda brunnar på gelkortet med tejp. Se även under rubrik Säkerhetsrutiner, olycksfallsrisker och arbetsmiljörisk. Bedömning Blodgruppskontroll : +++/++++ positiv +/++ tveksam reaktion, ej bedömbar - negativ ++++/- blandbild, mixed field Antigenbestämning Anti-A +++/ / / /- Anti-B - +++/ / /- ++++/- Blodgrupp A B AB O Blandbild Erhålls tveksam reaktion eller blandbild, se Åtgärder vid ej godkänd förenlighetsprövning. Antikroppsscreening : Endast genomgående negativa reaktioner kan uttolkas som negativ BAS-test. Vid ej godkänt resultat, se Åtgärder vid ej godkänd förenlighetsprövning För testerytrocyternas antigenuppsättning, se bilaga. Avläsning och registrering av resultat - manuell Avläsning och dataregistrering ska utföras av den person som utfört laborationen /8

4 Avläs och gradera enl instruktion Agglutinationsgradering. Protokollför i direkt anslutning till avläsningen. Tolka ABO-grupp och sammanfatta screeningresultat samt signera protokoll. Välj P562 för inregistrering och utför två inläsningar. Första inläsningen: Reaktioner - Ange 1 för omgång 1. - Registrera BAS-labnummer. - Ange för blodgruppskontroll: - = negativt resultat, + = positivt resultat, M = Mixed field eller inkonklusiv. - Ange för antikroppsscreening: - = negativt resultat, + = positivt resultat, U = till utredning U används för att spärra giltig BAS-test, tex. i avvaktan på resultat av transfusionsutredning eller för att förhindra BAS-test. Andra inläsningen: Resultat - Ange 2 för omgång 2. - Registrera BAS- labnummer. - Ange för blodgruppskontroll: 0 A B AB X = ej bestämbar. - Ange för antikroppsscreening: N = negativ screening, P = positiv screening, U = till utredning. Kontrollera kvittensrutan, i nästa skärm, att antalet BAS-tester i olika faser stämmer innan du godkänner. Efter registrering av blandbild: Svara ja på frågan om laborationen ska skickas till utredning. BAS-test svar skrivs automatiskt ut efter godkänt och uppdaterat resultat. Svarsrutiner - Två BAS-testsvar och en blodbeställningssedel (ej vid vilande BAS-test) skrivs ut. - Häfta ihop ett av svaren med inkommande remiss och sätt detta i låda/pärm "Giltiga BAS-tester". - Skicka BAS-testsvar nummer två inkl ny blodbeställningssedel till svarsmottagare. - Vilande BAS-test blir klar när blodgrupperingen har uppdaterats och svaras då automatiskt ut. Vid godkänd BAS-test skrivs följande svar ut GODKÄND BAS-TEST GODKÄND FÖR BLODUTLÄMNING T O M: Vid ej godkänd BAS-test skrivs följande svar ut EJ GODKÄND BAS-TEST Utredning pågår Vid blodutlämning krävs serologisk förenlighets prövning (= korstest Efter antikroppsutredning skrivs slutgiltigt svar ut av utredningsansvarig via P563. Vid positiv antikroppsutredning skrivs följande svar ut EJ GODKÄND BAS-TEST Vid blodbeställning krävs serologisk förenlighetsprövning (= korstest) /8

5 För svarsutlämnande vid datastopp, se Arbetsrutiner vid datastopp - "Reservrutin: BAS-test då datautskriven blodbeställningssedel finns eller akutgruppering utförts". BAS-testens giltighetstid till 5 dygn anges på BAS-testsvaret och giltighetstiden räknas från provtagningsdatum. För reservation och blodutlämning efter BAS-test, se instruktion Reservation och utlämning av blodkomponent. Arkivering Resultatet arkiveras permanent i databas. Förvara protokoll i pärm märkt BAS-testprotokoll. Förvara BAS-test-svar och inkommande blodbeställningssedel/remiss i pärm/låda märkt Giltiga BAS-tester under 5 dygn. Flytta därefter dokumenten till pärm/låda märkt Utdaterade BAS-tester. Se Verksamhetshandboken/Arkivering, avsnitt Arkiveringsregler inom Transfusionsmedicin. Avdelningens svar kasseras efter giltighetstidens utgång. Åtgärder vid avvikelser - Vid ej godkänd antikroppsscreening se Åtgärder vid ej godkänd förenlighetsprövning - Vid avvikande blodgruppsresultat gentemot databasen skrivs inget BAS-testsvar ut. Det aktuella BAS-labnumret makuleras och är därmed förverkat. - Om M anges i omgång 1 ska X anges i omgång 2 och laborationen skickas till utredning. Vid utkvittering via P563, efter utredning enligt Åtgärder vid ej godkänd förenlighetsprövning, anges blodgrupp från databas. - Vid ej överensstämmande inläsning mellan reaktioner och resultat krävs omregistrering. - Vid ej godkänt resultat på internkontroll: Tag fram nya testerytrocyter och sätt kontroll på dessa. Vid godkänt resultat på kontroll sätts alla BAS-tester om som analyserats efter senast godkända resutat på internkontroll. - För övriga avvikelser vid BAS-test, se instruktion Åtgärder vid ej godkänd förenlighetsprövning. Felkällor Falskt positiv reaktion kan erhållas vid: - för stark eller för stor mängd erytrocytsuspension - för lågt varvtal på centrifugen - för kallt prov och reagens - inget buffertlager ovanpå gelen - infekterat prov - heparinbehandlat provtagningsrör Falskt negativ reaktion kan erhållas vid: - För högt varvtal på centrifugen Starkt hemolyserat prov kan föranleda en rödfärgning av gelen vilket medför att svaga reaktioner kan vara svåra att upptäcka. Felaktigt satt serum i minikolonnens reaktionsbrunnar kan medföra missad antigen-antikroppsreaktion. Bra att veta - Spärra BAS-test vid positiv DAT. Fejka en positiv BAS-test som sedan raderas av person med raderingsbehörighet. - Serum/plasma ska tillsättas inom 10 minuter efter testerytrocyterna annars hinner dessa sedimentera utan att träffa ev antikroppar i serum/plasma. Om patienten har antikroppar kan testen uppvisa blandbild eller i värsta fall falskt negativt resultat /8

6 - Testerytrocyterna förvaras vid USÖ i flytande kväve. Efter upptining, tvättning och konservering kan suspensionen förvaras max 32 dygn vid 4 o C. - Vid leverans av nya testerytrocyter ska de som är 30 dygn kasseras och nya tas ibruk. - Vid första dagen för ibruktagande av testerytrocyter ska dag 1 och dag 7 anges på rören. Ibruktagna testerytrocyter är hållbara 7 dygn vid blandad förvaring i rumstemperatur och + 4 o C. Beakta rörens totala hållbarhet vid ibruktagande. - Vilande BAS-test uppdateras först när blodgrupperingsresultat uppdateras från akutgruppering eller gruppering i serie. - BAS-labnummer som makuleras automatiskt debiteras inte. - Om man vid BAS-testregistreringen efter inregistrering av båda omgångarna får programavbrott, kommer BAS-testsvar ut men de uppdateras inte, omgång 2 måste läsas in på nytt. Kontrollera därför alltid i datorn att BAS-testen är giltig om något avbrott skett under resultatregistreringen. - BAS-test protokoll kan skrivas ut i P811 om man glömt att bocka "skriv protokoll" i P533. Säkerhetsrutiner, olycksfallsrisker och arbetsmiljörisk Vid blodsmitta ska ansikte skyddas och skyddshandskar användas. Skyddshandskar ska bytas mellan orent och rent arbete. Allt materiel ingående i laborationen ska etiketteras med Blodsmitta. Se föreskrifter i Lokala anvisningar under externa referenser. Litteraturreferenser Säfwenberg J, Högman C, Cassemar B. Flodin M, Gillberg G. Type and screen combined with computerized delivery control. A safe pretransfusion procedure (abstract). 18th Congress of the international Society of Blood Transfusion, Munich, 1984 July Säfwenberg J. Erfarenheter av BAS-test vid förenlighetsprövning. Nordisk Medicin, 1987, 102, Lapierre Y, Rigal D, Adams J, Josef D, Meyer F, Greber S and Drot C. The Gel Test; A new way to detect red cell antigen-antibody reaction. Transfusion 1990, 30, Säfwenberg J, Hagström U, Englund Å. BAC-test for non immunized patients using a special gel test card. In: The Gel test, a new horizon in the blood group serology. Symposium: New tecniques in blood serology at the World Congress of Medical Tecnology; 1990 August 5-10, Geneva. DiaMed AG, 1991: Säfwenberg J, Högman C F, Cassemar B. ABCD-test, A safe pretransfusion procedure in use since more than 10 years. XXIII ISBT Congress, Amsterdam Hagström U, Filbey D, Säfwenberg J. Indirekt antiglublintest med gelteknik: ID-Cellstab kan ersätta ID-diluent 2. Läkaresällskapets handlingar Hygiea, Säfwenberg J, Högman C F, Cassemar B. Computerized Delivery Control - a Useful and Safe Complement to the Type and Screen Compatibilty Testing. Vox Sanguinis 1997;72: BAS-test: Blodgruppskontroll och antikroppsscreening med gelteknik Avd. för klinisk immunologi och transfusionsmedicin. Ackademiska sjukhuset, Uppsala /8

7 Bilaga Antigram för testerytrocyter BI - BIV BI BII BIII BIV R w1 R 1 R 1 R 1 R 2 R 2 rr D C C W c E e f Le a Le b P M N S s K k Kp a Kp b Js a - - / / Js b + + / / Fy a Fy b Jk a Jk b Lu a Lu b Co a Co b Rd Wr a Vel Yt a Kn a + + / / Kn a /McC a + + / / Sd a Xg a Ch Bg / = ej utförd Externa referenser: *** Slut på dokumentet *** Interna referenser: Lokala anvisnngar BJON-58TJDK: Metodkontroll - BAS-test BJON-5MBJ7K: Ankomstkontroll av testreagens /8

8 BJON-5RQHTV: Åtgärder vid ej godkänd förenlighetsprövning BJON-5RYCDM: Dokumentation av testreagens BJON-5VMB36: Förberedande åtgärder - Blodgruppserologiska undersökningar BJON-69XDBQ: Testreagens - Fabrikat och användningsområde CBET-5DTDW8: Acceptans; inmärkning och registering av prov EOLN-59TC8J: Agglutinationsgradering EOLN-5A58NP: Externa kontrollprogram; förteckning EOLN-5LWHTG: Reservation och utlämning av blodkomponent EOLN-5NUBQE: Arbetsrutiner vid datastopp EOLN-5WCHPK: Materiel - Fabrikat och användningsområde EOLN-5WR9EW: Beredning av testerytrocyter /8