Expression, produktion och rening av Fatty acid binding protein (FABP) från ökenmyran Cataglyphis fortis
|
|
- Inga Hansson
- för 8 år sedan
- Visningar:
Transkript
1 UNIVERSITETET I LINKÖPING Proteinkemi Kemiavdelningen Expression, produktion och rening av Fatty acid binding protein (FABP) från ökenmyran Cataglyphis fortis
2 Produktion av FABP i E. coli bakterier 1. Introduktion I detta laborationsmoment skall ett protein, fatty acid binding protein, FABP, från ökenmyran Cataglyphis fortis eller lägesspecifikt muterad FABP produceras med hjälp av E. coli bakterier. Dessa bakterier innehåller en plasmid, där genen för FABP är insatt. Denna plasmid är också en expressionsvektor, vilket gör att man kan slå på transkriptionen av FABP genen med en inducer. En repressormolekyl är till en början bunden till operatorregionen vid lacpromotorn. Då en inducer (IPTG; isopropyl-β-d-tiogalaktopyranosid) tillsätts binder den till repressorn, som därmed lossnar från operatorgenen, vilket leder till att RNA-polymeraset kan påbörja transkriptionen av T7 RNA-polymeras. T7 RNA-polymeras binder hårt till T7 promotorn, vilket leder till effektiv transkription av FABP. Plasmiden innehåller också en gen, som kodar för antibiotikaresistens. Detta leder till att man kan skilja på bakterier, som har denna plasmid från dem som saknar denna, genom att tillsätta antibiotika till odlingsmediet. På detta sätt kommer endast de bakterier som innehåller plasmiden att växa. Kanamycin är det antibiotikum som plasmiden ger upphov till resistens mot, varför Kanamycin hela tiden bör finnas med i odlingsmediet. Det producerade FABP hamnar i E. coli bakteriernas cytoplasma. Detta innebär att man måste förstöra bakteriernas cellväggar, för att komma åt FABP. Detta görs med hjälp av sonikering dvs bryta sönder cellmembranet med hjälp av ultraljud. När cellväggen är sprängd separeras den från cytoplasman genom centrifugering, så att man får en lösning endast innehållande cytoplasman. I cytoplasman finns nu FABP tillsammans med c:a 2000 andra proteiner. Genom att använda en His-Tag specifik reningsmetod kan man separera FABP från alla de andra proteinerna i ett enda reningssteg (His-Tag kromatografi). Uttryck av det klonade och muterade proteinet kan kontrolleras med SDS- PAGE. Tag därför ut prover under olika skeden i produktions- och reningsprocessen för analys vid SDS-PAGE-laborationen. Spara härför 50µl lösning i eppendorfrör i frys till analysen. Ni får själva välja hur många prov och efter vilka moment som lösning skall sparas. Diskutera gärna dessa prover med laborationshandledaren.
3 Utförande Provberedning Gör iordning följande lösningar: LB-Medium 20g/l Trypticase (Peptone) 20 g/l NaCl 10 g/l Yeast Extract Kanamycinstam (30 mg/ml) 10 ml Tag 300 mg Kanamycin och lös i 10 ml dest-h2o. Sterilfiltrera lösningen genom att trycka lösningen genom ett sterilfilter ned i sterila Eppendorfrör ~1.5 ml i varje rör. Stammen förvaras i frys och tinas inför användning i rumstemperatur. IPTG stam (0.5 M ) 10 ml Väg in 1.19 g IPTG och lös i 10 ml Dest H2O. Sterilfiltrera lösningen genom att trycka lösningen genom ett sterilfilter ned i sterila Eppendorfrör ~1.5 ml i varje rör. Stammen förvaras i frys och tinas inför användning i rumstemperatur. Autoklavering Autoklavera följande material: 1,5 l LB i 5 l E-kolv 2 x 250 ml i flaska Ö/N odlingskolvar med 15 ml LB-mediet ska autoklaveras och autoklaveringstiden räknas ut med hjälp av tabellen som finns i Autoklaveringsrummet. Ympning av bakterier till liten odling: Efter autoklaveringen när lösningen har svalnat tillsätts 30 µg/ml kanamycin (1000ggr spädning) till övernattsodlingskolven (200ml kolv) innehållande 15 ml LB-medium. Tina bakterier från stammarna i på is. Tillsätt lämplig mängd bakteriestam är c:a µl. Vänd bakteriestammen upp och ned innan för att blanda bakterierna med den glycerol som de förvaras i. Ställ sedan odlingen på tillväxt vid 37 C över natt.
4 Ympning av bakterier till stor odling: Tillsätts 30 µg/ml Kanamycin (1000ggr spädning) till stora odlingskolven (5 l kolv) innehållande 1,5 l LB-medium. Överför allt från Ö/N odling (15 ml) till den stora 1,5-liters LB-lösningen Ställ sedan den stora odlingen på ett skakbord för tillväxt i 37 C. Gemensam fortsättning: Följ sedan tillväxten genom att mäta absorbansen vid 660 nm som speglar celltätheten. Detta görs genom att suga upp LB-medium med en steril pipett ( 3-5 ml). Mät i plastkuvetter, använd dest-h2o som referens. När absorbansen är c:a 0,8 tillsätts 1.5 ml av inducern, isopropyl-β-d-tiogalaktopyranosid för att inducera produktionen av Fatty acid binding protein (FABP) i E. coli bakterierna. Efter denna tillsatts får odlingen pågå i rumstemperatur under natten. Odlingen avbryts. Bakterielösningen centrifugeras vid 3200 rpm i 20 min (4 C) i stora centrifugflaskor. På så vis kan man separera bakteriecellerna från odlingsmediet. Supernatanten hälls försiktigt tillbaka i kolven och autoklaveras därefter innan det kastas. Pelleten bestående av bakterier slammas upp i en liten volym (max. 30 ml) resuspensionbuffert (20 mm Tris-HCl, 150 mm NaCl, 5mM Imidazole, ph 8) till Ni-NTA kromatografi (His-Tag rening) för söndertagning av bakteriecellerna med hjälp av sonikering. Sonikering (ultaljudbehandling): Sonikering används ofta för att bryta sönder cellmembraner, varvid ultraljud (typiskt khz) genereras elektroniskt och den mekaniska energin överförs till provet via en metallprob som oscillerar med hög frekvens och som ger upphov till begränsade områden med högt tryck. Detta leder till kavitering och sammanpressning i lösningen, vilket till sist gör att celler bryts upp och proteininnehållet kommer ut i lösningen. Sonikering sker 6x10 sek med 10 sek mellanrum på ett prov på max 30 ml. Provet förvaras på is under behandlingen. Förvara sedan proteinlösningen kyld tills kromatografin sker. Qiagen Ni-NTA Kromatografi Lösningar: Resuspensionbuffert (20 mm Tris-HCl, 150 mm NaCl, 5mM Imidazole, ph 8) Tvättbuffert (20 mm Tris-HCl, 150 mm NaCl, 20 mm Imidazole, ph 8) Elueringsbuffert A (20 mm Tris-HCl, 150 mm NaCl, 250 mm Imidazole, ph 8) Elueringsbuffert B (20 mm Tris-HCl, 150 mm NaCl, 500 mm Imidazole, ph 8)
5 Ekvilibrera kolonnen med 10 ml resuspension buffert Applicera provet (1-35 ml). Flödet bör vara 1 ml/min. Samla upp genomflödet i en bägare. Tvätta med 4 ml tvättbuffert (20 mm Tris-HCl, 150 mm NaCl, 20 mm Imidazole, ph 8). Samla upp genomflödet i en bägare. Eluera med 3 ml elueringsbuffert A (20 mm Tris-HCl, 150 mm NaCl, 250 mm Imidazole, ph 8) Applicera 3 ml elueringsbuffert B (20 mm Tris-HCl, 150 mm NaCl, 500 mm Imidazole, ph 8). Samla upp i fraktioner (Eppendorfför 1 ml i varje fraction) Poola ihop fraktionerna och dialysera Efter användning: Tvätta gelen med 30 ml 0.5 m NaOH. Förvara i 30 % etanol.
6 SDS-Polyakrylamidgelelektrofores (SDS-PAGE) 1. Introduktion Efter att FABP renats fram med affinitetskromatografi, skall renheten studeras med hjälp av SDS-PAGE. Dessutom ska renhet och uttryck av FABP studeras på prover som tagits undan efter olika moment under produktionsprocessen. Det är den vanligast förekommande metoden för att följa en upprening av ett protein och avgöra hur rent proteinet är. Denna metod separerar proteiner beroende på deras storlek. Genom att SDS (sodium dodecylsulfate), som är negativt laddat, sätts till provet får proteinerna en negativ laddning, som är direkt proportionell mot proteinets storlek. Detta sker genom att SDS binder till proteinet. Polyakrylamidgelen består av ett nätverk som proteinerna måste vandra igenom. Nätverkets storlek beror på proportionerna av akrylamid och bis-akrylamid. Dessa proportioner väljs så att de proteiner man vill studera separerar från varandra på gelen. Man inkluderar också ett antal referensproteiner med känd molekylvikt i sin analys. Dessa körs separat på samma gel, så att man utifrån dessa kan uppskatta sitt eget provs molekylvikt. Genom att avsätta logaritmen för molekylvikten hos referensproteinerna mot vandringslängden erhålls en rät linje. Det är sen enkelt att uppskatta molekylvikten hos provet genom att använda referensgrafen. UTFÖRANDE OBS! För detta moment används Färdigpolymeriserade gelplattor som erhålls av labhandledaren. Provberedning: Prov: Lämplig provmängd att applicera är c:a 10 µg protein, maximal volym i en provbrunn är c:a 35 µl. Räkna först ut vilken volym prov ni skall ta. Provet blandas sen med 10 µl provcocktail, och 1 µl β-merkaptoetanol. Tillsätt 5 µl bromfenolblått (BFB). Blandningen upphettas i kokande vatten i 2-3 min. Sedan appliceras provet i provbrunnarna. Referens: 5 µl färdigblandad referenslösning, 10 µl provcocktail, 5 µl BFB och 1 µl β- merkaptoetanol blandas. Detta behandlas sedan som ovan. Elektrofores: Koppla ihop ihop gelkassetterna med elektroforesvannan. Späd elektrod-bufferten 5 ggr med dest-h 2 O till en slutvolym på 850 ml och häll den i elektroforesvannan (i det inre och yttre utrymmet). Kör vid 50 V genom koncentrationsgelen och öka sedan till 200 V. Avbryt körningen när det blåa bandet har vandrat till slutet på gelen.
7 Fixering-färgning och avfärgning: 1. Ta ut gelen från glasplattorna 2. Placera gelen i vatten så att den är väl täckt 3. Värme i mikrovågsugnen så att den nästan kokar. Den får inte koka vilket riskerar att förstöra gelen. Ta ungefär så mycket att det tar 40 s att värma vattnet. 4. Häll av vattnet utan att hälla ut gelen. 5. Repetera steg 2-4 ytterligare tre gånger 6. Häll Safestain över gelen så att den täcks. Värm i mikrovågsugnen tills den nsätan kokar. 7. Färga in i 30 min 8. Avfärga i vatten Fotografering av gelen: Gelen tvättas i dest-h 2 O och förvaras därefter i 20 % (v/v) etanol inför fotograferingen.
Isolering och rening av proteinet tiopurinmetyltransferas
Isolering och rening av proteinet tiopurinmetyltransferas Inledning och syfte Proteinet tiopurinmetyltransferas (TPMT) är ett humant enzym vars naturliga funktion ännu är okänd. Proteinet katalyserar överföring
Läs merLAB 12. Preparation och analys av plasmid-dna från E.coli
Institutionen för biokemi och biofysik LAB 12 Preparation och analys av plasmid-dna från E.coli Basåret 2012 (finns på basårshemsida: www.kemi.su.se, välj Basår) INTRODUKTION I denna laboration ska vi
Läs merPreparation av hemoglobin med hjälp av gelfiltrering
Preparation av hemoglobin med hjälp av gelfiltrering Teori Vid preparation av ett protein används en rad olika metoder för att specifikt rena fram det önskade proteinet. I vårt fall ska hemoglobin från
Läs merIntroduktion till laboration Biokemi 1
Introduktion till laboration Biokemi 1 Annica Blissing IFM Biochemistry Upplägg Laborationen sträcker sig över flera tillfällen Isolering, gelfiltrering, absorbansmätning och påvisande av sulfat Provberedning,
Läs merLinköpings Universitet. Laboration i genteknik
IFM/Kemi Linköpings Universitet Maj 2008/LGM Laboration i genteknik Restriktionskarta av pcantab Restriktionsklyvning samt separation av DNA-fragment mha agarosgelelektrofores Material: pcantab (minst
Läs merInstitutionen för laboratoriemedicin Bilaga 2 Biomedicinska analytikerprogrammet Analytisk Kemi och Biokemisk metodik Ht 2010, Termin 3
Institutionen för laboratoriemedicin Bilaga 2 Biomedicinska analytikerprogrammet Analytisk Kemi och Biokemisk metodik Ht 2010, Termin 3 Laborationsdatum: 17 22 november 2010 Grupp: 2 Projekt: Rening och
Läs merDNA-labb / Plasmidlabb
Översikt DNA-labb Plasmidlabb Preparation och analys av -DNA från Escherichia coli Varför är vi här idag? Kort introduktion till biokemi och rekombinant DNA- teknologi Vad skall vi göra idag? Genomgång
Läs merTillämpning av olika molekylärbiologiska verktyg för kloning av en gen
IFM/Kemi Linköpings Universitet September 2011/LGM Projektlaboration i genteknik Tillämpning av olika molekylärbiologiska verktyg för kloning av en gen Innehållsförteckning Inledning... 3 Amplifiering
Läs merWestern blot. BMA-09, VT-11, Termin 4. Ylva Hedberg Fransson
Western blot BMA-09, VT-11, Termin 4 Ylva Hedberg Fransson Laborationer I denna laboration ingår tre laborativa moment; 1) lösningsberedning 2) elektrofores med SDS-PAGE och transfer 3) immunodetektion
Läs merPreparation och spektroskopisk karakterisering av Myoglobin
Datum på laborationen: 2010-11-16 Handledare: Alexander Engström Preparation och spektroskopisk karakterisering av Myoglobin Namn/Laborant: Jacob Blomkvist Medlaborant: Emmi Lindgren Antonia Alfredsson
Läs mer/LGM. Amplifiering och analys av humant mitokondrie-dna med hjälp av PCR teknik och agarosgelelektrofores
2008-01-18/LGM Amplifiering och analys av humant mitokondrie-dna med hjälp av PCR teknik och agarosgelelektrofores Syfte: Med två olika DNA extraktionsmetoder försöka få fram tillräckligt mycket celler
Läs merKromatografi. Kromatografi
Kromatografi Tekniker för att Rena Ex. inför vidare studier, terapeutisk användning etc. Fraktionera Ex. inför vidare analys, Depletion av HAPs från plasma inför 2D-gel (max-kapacitet
Läs merTFKE32/TFKI09/9KEA21. Laboration i Genteknik
TFKE32/TFKI09/9KEA21 Laboration i Genteknik Denna laboration består av tre delar: A. Restriktionsklyvning av plasmiden pcantab samt konstruering av restriktionskarta. B. Preparation av plasmiden pcantab
Läs merNationellt Samverkansprojekt Biogas i Fordon
Nationellt Samverkansprojekt Biogas i Fordon Ekologisk lunga för biogasuppgradering 610401 ISSN 1651-5501 Projektet delfinansieras av Energimyndigheten Svenska Biogasföreningen Telefon Telefax Hemsida
Läs merLaboratoriemetod för att manuellt rena DNA från ett prov på 0,5 ml
Laboratoriemetod för att manuellt rena DNA från ett prov på 0,5 ml För att rena genomiskt DNA från insamlingssatser tillhörande Oragene och ORAcollect -familjerna. Besök vår hemsida, www.dnagenotek.com,
Läs merUMEÅ UNIVERSITET 2011-01-11. Målsättning Att använda metoder för direkt observation av mikroorganismer.
UMEÅ UNIVERSITET 2011-01-11 Institutionen för molekylärbiologi RUT10 - Biomedicinsk vetenskap I FÄRGNING OCH MIKROSKOPERING AV MIKROORGANISMER Målsättning Att använda metoder för direkt observation av
Läs merUttryck av kloratreduktas och kloritdismutas i Ideonella dechloratans odlade i aerob miljö med tillsatt klorat
Karlstads Universitet Fakulteten för teknik- och naturvetenskap Avdelningen för kemi Uttryck av kloratreduktas och kloritdismutas i Ideonella dechloratans odlade i aerob miljö med tillsatt klorat Laboranter
Läs merÖrebro universitet Institutionen för hälsovetenskap och medicin Enheten klinisk medicin. Datum 131123 Skrivtid 240 minuter. Charlotte Sahlberg Bang
Örebro universitet Institutionen för hälsovetenskap och medicin Enheten klinisk medicin Tentamen Kursens namn: BMLV A, Biomedicinsk laboratoriemetodik Kurskod: BL 1015 (BL1001) Kursansvarig: Siw Lunander
Läs merUtveckling av reningsmetod för cytokrom c-id1 från Ideonella dechloratans
Fakulteten för teknik och naturvetenskap Johan Celander Utveckling av reningsmetod för cytokrom c-id1 från Ideonella dechloratans Optimization of a Purification Method for Cytochrome c-id1 from Ideonella
Läs merRening av proteiner: hur och varför?
Rening av proteiner: hur och varför? (och lite biologiska grunder) Joakim Norbeck! norbeck@chalmers.se! Grunder! Plasmider! Protein-rening! Detektion!!!!! Mest relevanta sidor i "Cell" är 510-518 & 532-552!
Läs merLinköpings Universitet. Lägesspecifik mutagenes av proteiner
IFM/Kemi Augusti2011/LGM Linköpings Universitet Lägesspecifik mutagenes av proteiner Figur1. Flödesschema över lägesspecifik mutagenes laboration. Lägesspecifik mutagenes Introduktion In vitro lägesspecifik
Läs merfå se en naturvetenskaplig forskningsmiljö och träffa människorna i den miljön.
Martin Andersson 780920-1978 Kurs 3, Professionen Lärarutbildningen Malmö högskola NO-relaterat studiebesök Jag tänkte att mina gymnasieelever skulle få göra ett studiebesök på en universitetsavdelning
Läs mer/2012. Från Unilabs Laboratoriemedicin, Västra Götaland - gällande fr.o.m. 2012-11-28 (om inget annat datum anges)
Datum 2012-11-06 Meddelande 6/20 /2012 Från Unilabs Laboratoriemedicin, Västra Götaland - gällande fr.o.m. 2012-11-28 (om inget annat datum anges) Kundtjänst informerar Ny medicinsk artikel - Alkoholmarkören
Läs merIntroduktion till labkursen på Biokemi 1
Introduktion till labkursen på Biokemi 1 Annica Theresia Blissing IFM Molekylär bioteknik Upplägg Laborationen sträcker sig över flera tillfällen: Isolering, gelfiltrering, absorbansmätning och påvisande
Läs merCELLODLINGSHANDLEDNING
CELLODLINGSHANDLEDNING inom kursen Morfologisk metodik och Cellodling, 7.5hp Göteborg 2014-08 Ali-Reza Moslemi och Inger Johansson LABORATION: TILLVÄXTKURVA PÅ AGS-CELLER INTRODUKTION Sterilarbete och
Läs merBASÅRET KEMI B BIOKEMI VT 2012. PROTEINER OCH ENZYMER 174-190 (sid. 140-156)
BASÅRET KEMI B BIOKEMI PROTEINER OCH ENZYMER 174-190 (sid. 140-156) Hur lätt blir det fel i strukturen? ganska stora skillnader i sekvens - ganska lika strukturer proteinerna är bara identiska i 27 av
Läs merNamn: student x & student y Kurs: FAGBH0 Utförd: 090526
Laboration: Isolering av kinin Namn: student x & student y Kurs: FAGBH0 Utförd: 090526 Handledare: Patrik Holm 1 Innehållsförteckning Innehållsförteckning... 2 Sammanfattning... 3 Inledning... 3 Utförande...
Läs merLaborationshandledning i galenisk farmaci
Laborationshandledning i galenisk farmaci Laborationerna består av extemporetillverkning av salvor och ögondroppar samt tablettillverkning och karakterisering av tabletter. Vid tillverkning av de olika
Läs merDatum 130813 Skrivtid 240 minuter. Charlotte Sahlberg Bang, 8 poäng. Ulla Ericsson, 6 poäng Karin Franzen, 7 poäng Rolf Pettersson, 6 poäng
Tentamen Kursens namn: BMLV A, Biomedicinsk laboratoriemetodik Kurskod: BL 1001 Kursansvarig: Siw Lunander Datum 130813 Skrivtid 240 minuter Totalpoäng: 50 poäng Bengt Löfstrand, 1 Charlotte Sahlberg Bang,
Läs merFörsök till att lösa degraderingsproblem vid preparation av fotosystem I-subenheten PSI-N genom att använda proteasinhibitorer och olika sorters lysis
Halmstad Högskola Sektionen för Ekonomi och Teknik Försök till att lösa degraderingsproblem vid preparation av fotosystem I-subenheten PSI-N genom att använda proteasinhibitorer och olika sorters lysis
Läs merKlimatförändringen en drivkraft för vattenburen smitta? Ann-Sofi Rehnstam-Holm Högskolan Kristianstad
Klimatförändringen en drivkraft för vattenburen smitta? Ann-Sofi Rehnstam-Holm Högskolan Kristianstad Kristianstad Reningsverk Hammarsjön Våtmarker Helge Å Lillö Vattenburna infektioner Förändringar att
Läs merKloning och rening av GFP
Kloning och rening av GFP Ida Harila Projektarbete 100p Luleå 2012 Handledare: Marcus Wallgren Sammanfattning Upptäckten och användningsområden för det grönt fluorescerande proteinet, GFP har visat ha
Läs merLaboration DNA. Datum:16/11 20/ Labgrupp: 11 Laboranter: Johanna Olsson & Kent Johansson
Laboration DNA Datum:16/11 20/11 2015 Labgrupp: 11 Laboranter: Johanna Olsson & Kent Johansson Material och metod Materiallista hänvisas till labhandledning s.3 (BIMA15 ht 2015, Lab III: DNA.) Uppsamling
Läs mer30. Undersökning av aminosyror i surkål
30. Undersökning av aminosyror i surkål VAD GÅR LABORATIONEN UT PÅ? Du ska l ära dig tekniken vid tunnskiktskromatografi, TLC undersöka vad som händer med proteinerna och polysackariderna vid mjölksyrajäsning
Läs merSPEKTROFOTOMETRISK BESTÄMNING AV KOPPARHALTEN I MÄSSING
1 SPEKTROFOTOMETRISK BESTÄMNING AV KOPPARHALTEN I MÄSSING Spektrofotometri som analysmetod Spektrofotometrin är en fysikalisk-kemisk analysmetod där man mäter en fysikalisk storhet, ljusabsorbansen, i
Läs merUppsala Universitet Institutionen för fotokemi och molekylärvetenskap EG 2008-09-08 FH 2009-08-18. Konjugerade molekyler
Uppsala Universitet Institutionen för fotokemi och molekylärvetenskap EG 2008-09-08 FH 2009-08-18 Konjugerade molekyler Introduktion Syftet med den här laborationen är att studera hur ljus och materia
Läs merJonbyteskromatografi
Jonbyteskromatografi Den mest frekvent använda proteinreningsmetoden Bygger på laddad interaktion mellan målproteinet i lösning och en fast matris. Beroende av:! Lösningens ph! Målproteinet och kontaminanternas
Läs merKlor och Bromin manuellt tillsatt
Klor och Bromin manuellt tillsatt Det absolut viktigaste i all rening av vatten är att vi har ett korrekt ph värde. Om ph är för lågt eller för högt, så kan inte klor eller Bromin arbeta på ett bra sätt.
Läs merAnolytech ANK-Anolyt för bättre djurhälsa och ökad produktion. Enkelt, miljövänligt och ekonomiskt.
Anolytech ANK-Anolyt för bättre djurhälsa och ökad produktion. Enkelt, miljövänligt och ekonomiskt. Dina djur mår bättre med rent dricksvatten. Och de producerar bättre! Rent dricksvatten är en förutsättning
Läs merCellskada och manipulering av cellers känslighet för stress
Cellskada och manipulering av cellers känslighet för stress Bakgrund En cellskada kan uppstå på många olika sätt, till exempel exponering för kemikalier, värme, kyla, hypoxi, ischemi eller strålning. Hur
Läs merKRISTALLISERING AV LYSOZYM
KRISTLLISERING V LYSOZYM ETT EXEMPEL PÅ PROTEINKRISTLLISERING Laboration i kursen Experimentell Kemi Gävle 14:e augusti 2013 Handledare: Petra Elund, Göteborgs Universitet (petra.edlund@gu.se) KRISTLLISERING
Läs merGenkloning och PCR av tetracyklinresistensgen. från pacyc184 till puc19
Umeå Universitet Biomedicinska analytikerprogrammet Genkloning och PCR av tetracyklinresistensgen från pacyc184 till puc19 Årskull: Laborationsrapport i Molekylärbiologisk laboratoriemetodik, termin 3
Läs merLycka till! Kursens namn : Medicin A, Introduktion till medicin. Kurskod: MC1010. Kursansvarig: Eva Funk. Datum: 091105 Skrivtid 4 timmar
Kursens namn : Medicin A, Introduktion till medicin Kurskod: MC1010 Kursansvarig: Eva Funk Datum: 091105 Skrivtid 4 timmar Totalpoäng: 75 poäng Poängfördelning: Jessica Johansson Bengt Löfstrand Marianne
Läs merLärarhandledning gällande sidorna 6-27 Inledning: (länk) Läromedlet har sju kapitel: 5. Celler och bioteknik
Senast uppdaterad 2012-12-09 55 Naturkunskap 1b Lärarhandledning gällande sidorna 6-27 Inledning: (länk) Celler och bioteknik C apensis Förlag AB Läromedlet har sju kapitel: 1. Ett hållbart samhälle 2.
Läs merLinköpings Universitet. Lägesspecifik Mutagenes av proteiner
IFM/Kemi Linköpings Universitet Augusti 2007/LGM Lägesspecifik Mutagenes av proteiner Lägesspecifik mutagenes Introduktion In vitro lägesspecifik mutagenes är en ovärderlig teknik för att t.ex. studera
Läs merIntroduktion till cellodling. cellen cellodling desinfektion
Introduktion till cellodling cellen cellodling desinfektion Milstolpar i cellodlingshistorik Hooke studerade kork och gav namnet cell till de små kammare som han såg Arnolds arbetade med grodlymfocyter
Läs merLaboration v.40 Detektion av Legionella pneumophilia med nestad PCR
Avdelningen för kemi och biomedicin Karlstads universitet Laboration v.40 Detektion av Legionella pneumophilia med nestad PCR Frågeställning: Vattenlednings system med tillväxt av Legionella pneumophilia
Läs merKromatografi. Idag
Lärarfortbildning 2019-05-07 Marie Danielsson 08 790 97 32 marie.danielsson@vetenskapenshus.se Idag Inledning - kromatografi Extraktion av växtfärgämnen Pappers- och tunnskiktskromatografi Fika Kolonnkromatografi
Läs merExtraktion och isolering av naturprodukter
Extraktion och isolering av naturprodukter Anders Herrmann 1) Teori och metoder för olika isoleringsarbeten 2) Praktisk isoleringsarbete Vad är en naturprodukt? Alla biologiska molekyler är egentligen
Läs merCellodling Laborationskompendium
Cellodling Laborationskompendium Sammanställd av Birgitta Sundström Material och lösningar: Odlingsmedium 50 ml Falconrör (blå skruvkort) Finns färdigt. DMEM:F12 1:1 med tillsats av 10% (v/v) fetalt kalvserum
Läs merFelveckning och denaturering av proteiner. Niklas Dahrén
Felveckning och denaturering av proteiner Niklas Dahrén Felveckning av proteiner Strukturen är helt avgörande för proteinets funktion ü E# protein är helt beroende av sin struktur för a& kunna fullgöra
Läs merFACIT TILL FINALEN GRUNDBOK
FACIT TILL FINALEN GRUNDBOK Kommentar: Ett sätt att avgöra om ett påstående bygger på naturvetenskap är att tänka efter om påståendet i första hand säger vad någon enskild person tycker. I så fall bygger
Läs merSatellitbild Lite korta fakta Ett unikt reningsverk 1 2 Processavloppsvattnet från läkemedelstillverkningen i Snäckviken pumpas i en 6,5 km lång ledning. Den är upphängd i en avloppstunnel som leder till
Läs merKarin Berg, Malin Lundin och Jessica Petersson. Miljövetarprogrammet Linköpings universitet, Campus Norrköping
Manual för analys av bakteriehalt i vatten: totalhalt - bestämning med ingjutningsmetoden, koliforma bakterier och E.Coli - bestämning med membranfiltermetoden. Karin Berg, Malin Lundin och Jessica Petersson
Läs merTentamen. Kurskod: MC1004. Medicin A, Molekylär cellbiologi. Kursansvarig: Christina Karlsson. Datum 130814 Skrivtid 4h
Tentamen Medicin A, Molekylär cellbiologi Kurskod: MC1004 Kursansvarig: Christina Karlsson Datum 130814 Skrivtid 4h Totalpoäng: 86p Poängfördelning Johanna Sundin (fråga 1 8): 18p Ignacio Rangel (fråga
Läs merPRODUKTRESUMÉ. Behandling av bakterieinfektioner orsakade av bakteriestammar som är känsliga för enrofloxacin.
PRODUKTRESUMÉ 1. DET VETERINÄRMEDICINSKA LÄKEMEDLETS NAMN Fenoflox vet 100 mg/ml injektionsvätska, lösning för nöt och svin 2. KVALITATIV OCH KVANTITATIV SAMMANSÄTTNING 1 ml innehåller: Aktiv substans:
Läs merProduktlista Reagenser
nummer B381450 5-Fluorouracil i 0.02 M fosfatbuffert ph 7.4 B380999 Aceton/Metanol (10:90) B381000 Acetonsprit 1:4 B381056 AEC 0,8 % i dimetylformamid B380990 AEC 3 stocklösning B381051 Akridinorange 0,01%
Läs merLeucosep-rör LTK.615 BIPACKSEDEL. För in vitro-diagnostik PI-LT.615-SE-V3
Leucosep-rör LTK.615 BIPACKSEDEL För in vitro-diagnostik PI-LT.615-SE-V3 Bruksanvisning Avsedd användning Leucosep-rör är avsedda att användas vid insamling och separation av perifera mononukleära celler
Läs merPROVTAGNINGSANVISNINGAR
PROVTAGNINGSANVISNINGAR Dessa anvisningar ersätter tidigare utgåva, daterad 2007-12-18. Provförteckning Se www.skane.se/usil/klingen För vårdgivare Analyser och tjänster som utförs av Genetiska kliniken.
Läs merCoatest SP Factor VIII 82 4086 63 Swedish revision 12/2004
AVSETT ÄNDAMÅL Kitet är avsett för fotometrisk bestämning av faktor VIII-aktivitet i plasma, antikoagulerad med citrat vid diagnostisering av FVIII-brist eller för monotorering av patienter i substitutionsterapi
Läs merRiskfaktorer. Normalflora. Hur förebygger vi smitta?
Hur förebygger vi smitta? Anna Hammarin Smittskyddssjuksköterska Smittskydd Stockholm 19 april 2016 Riskfaktorer Många bor tillsammans Gemensamma utrymmen Gemensamma toaletter Gemensamt kök Normalflora
Läs merTentamen 3p mikrobiologi inom biologi 45p, Fråga 1 (2p) Fråga 2 (2p) Fråga 3 (2p)
Tentamen 3p mikrobiologi inom biologi 45p, 050308 Fråga 1 Du har isolerat en bakterie och vill titta på om den kan förflytta sig, vilken/vilka metoder använder du? a Elektronmikroskopi b Gramfärgning c
Läs merTentamen i Immunteknologi 28 maj 2003, 8-13
Tentamen i Immunteknologi 28 maj 2003, 8-13 1 Varje fråga ger maximalt 5 p. 2 SKRIV NAMN OCH PERSONNUMMER PÅ ALLA SIDOR! 3 Glöm inte att lämna in KURSUTVÄRDERINGEN! Observera att i kursutvärderingen för
Läs merSTOCKHOLMS UNIVERSITET INSTITUTIONEN FÖR BIOLOGISK GRUNDUTBILDNING
STOCKHOLMS UNIVERSITET INSTITUTIONEN FÖR BIOLOGISK GRUNDUTBILDNING TENTAMEN Kurs: Prokaryot cell- och molekylärbiologi (PCMB) Datum: 2007-06-19 kl. 10-13 Visat betald terminsräkning och legitimation _
Läs merGlukosdehydrogenas. Laktos och Galaktos. Enzymatisk bestämning i livsmedel
Glukosdehydrogenas Laktos och Ga. Enzymatisk bestämning i livsmedel Innehållsförteckning 1. Ändamål och Användningsområde...1 2. Princip...1 3. Reagens...1 3.1 Citratbuffert...1 3.2 NAD-Citratbuffert...2
Läs merOMTENTAMEN 2 I LÄKEMEDELSBERÄKNING 2014-06-03 08.00-10.00
Malmö högskola Hälsa och samhälle Utbildningsområde: Omvårdnad Kod nr: Tidpunkt för inlämning: OMTENTAMEN 2 I LÄKEMEDELSBERÄKNING KURS OM121A, termin 2 2014-06-03 08.00-10.00 Hjälpmedel: Miniräknare, ej
Läs merJonisering. Hur fungerar jonisering? Vad är en jon?
JONISERING Jonisering Vad är en jon? Alla atomkärnor innehåller ett bestämt antal protoner och varje proton är positivt laddad. Runt kärnan snurrar ett lika stort antal elektroner som är negativt laddade.
Läs merNO-kemi 2017 Utvinning av ett bakteriedödande protein från ägg - en enkel och billig laboration med jonbyteskromatografi
NO-kemi 2017 Utvinning av ett bakteriedödande protein från ägg - en enkel och billig laboration med jonbyteskromatografi Rickard Hedman 2017 augusti 9 Introduktion Visste du att äggvita, saliv och tårvätska
Läs merMånadstema September: Kommunikation Laborationer för 7-9. Se även laborationsförslag för gymnasiet och F-6
Månadstema September: Kommunikation Laborationer för 7-9. Se även laborationsförslag för gymnasiet och F-6 Innehåll: Läckande ballonger s. 1 Vätepuffar s. 3 En doft som lök vad är den och vart tar den
Läs merLAB 11 STUDIER AV TEMPERATUR OCH
Institutionen för biokemi och biofysik LAB 11 STUDIER AV TEMPERATUR OCH ph-beroende HOS ENZYMET AMYLAS Basåret 2011 (finns på basårshemsida: www.kemi.su.se, välj basår) Introduktion Enzymet α-amylas som
Läs merDetektion av Borrelia burgdorferi IgG. med hjälp av ELISA
Umeå Universitet Biomedicinska analytikerprogrammet Detektion av Borrelia burgdorferi IgG med hjälp av ELISA Årskull: Laborationsrapport i immunologi termin 3 Laborationsdatum: Inlämnad: Godkänd: Handledare:
Läs merSTOCKHOLMS UNIVERSITET INSTITUTIONEN FÖR BIOLOGISK GRUNDUTBILDNING
STOCKHOLMS UNIVERSITET INSTITUTIONEN FÖR BIOLOGISK GRUNDUTBILDNING TENTAMEN Kurs: Prokaryot cell- och molekylärbiologi (PCMB) Datum: 2006-10-07 kl. 9-12 Visat betald terminsräkning och legitimation signatur
Läs merLaboratorieteknik. Innehåll: Laboratorieteknik
Laboratorieteknik Innehåll: 1. Allmänna anvisningar... 2 1.1. Utrustning på laboratoriet... 3 1.2 Riskanalys... 4 1.3 Laboratoriejournal... 6 1.4 Laborationsredogörelse... 9 2. Avdrivning av lösningsmedel
Läs merEtylacetat är lättantändligt, ingen öppen låga eller elplatta i närheten.
1 Isolering av koffein Koffein är en organisk förening som finns i bl.a. kaffe och te. Den hör till gruppen alkaloider. Kaffets uppiggande verkan beror på koffeinet. I en kopp medelstarkt kaffe finns 80-100
Läs merSpara energi i köket En stor del av hushållselen används för kyl och frys. Hur mycket el som kyl och frys drar beror på deras ålder och storlek.
Energispartips Spara energi i köket En stor del av hushållselen används för kyl och frys. Hur mycket el som kyl och frys drar beror på deras ålder och storlek. Kyl och frys: Frosta av kyl och frys regelbundet,
Läs merMetodbeskrivning hcg kassett och hcg Strip, urin, Analyz
Metodbeskrivning hcg kassett och hcg Strip, urin, Analyz Indikation Graviditet Medicinskbakgrund Humant koriongonadotropin (hcg) är ett glykoproteinhormon som utsöndras av moderkakan när den utvecklas
Läs merBioZone PowerZone för sanering
BioZone PowerZone för sanering BioZone PowerZone är till för lokaler med kraftiga lukter t ex brandrökskadade hus och lägenheter, cigarettinrökta lokaler/ hus/lägenheter/ husvagnar/bilar, starka lukter
Läs merC V C. Bruksanvisning till Biofortuna SSPGo TM HLA Wipe Test BF-40-01. Revision 3. Juli 2014
Dot159v1 Instructions for Use for Biofortuna SSPGo TM HLA Wipe Test BF-40-01 Sidan 1 av 8 Bruksanvisning till Biofortuna SSPGo TM HLA Wipe Test BF-40-01 Revision 3 Juli 2014 Dot159v1 Instructions for Use
Läs merOBS! Under rubriken lärares namn på gröna omslaget ange istället skrivningsområde.
BMLV A, biomedicinsk laboratoriemetodik, 7,5hp. Kurskod: BL1015, HK 2014 Kursansvarig: Siw Lunander Datum: 2014-10-17 Skrivtid: 4 timmar Totalpoäng: 54 p Lösningsberedning, 15 poäng Spektrofotometri, 6
Läs merElektrolysvatten. Miljövänlig teknologi för vattenrening,desinfektion och sterilisering
Elektrolysvatten Miljövänlig teknologi för vattenrening,desinfektion och sterilisering 1 Aquacode AB har specialiserat sig på att erbjuda kostnadseffektiva, miljövänliga och hälsoofarliga lösningar för
Läs merLaboration 1 BLADCO. Intracellulär signalering. Inledning. Venös provtagning. Neutrofilpreparation. Dag 1. Stimulering av neutrofiler
Laboration 1 BLADCO Intracellulär signalering Inledning Neutrofiler är kroppens primära försvar mot bakterieinfektioner. Genom fagocytos isolerar neutrofilen bakterien från omgivningen för att sedan med
Läs merCafeterian Haga Haninge
Cafeterian Haga Haninge 1 Innehållsförteckning Före... 3 Öppna... 3 Kaffe... 5 Korv... 7 Toast... 9 Fikabröd... 10 Diskmaskinen... 11 När disken är klar... 11 Köpa varor... 13 Om något behöver fyllas på...
Läs merHelsingfors universitet Urvalsprovet 30.5.2012 Agrikultur-forstvetenskapliga fakulteten
Helsingfors universitet Urvalsprovet 30.5.2012 Agrikultur-forstvetenskapliga fakulteten PROV 4 Växtproduktionsvetenskaper Husdjursvetenskap För att svaret skall beaktas skall den sökande få minst 7 poäng
Läs merDokumentnamn PM leukemier Utfärdare Martin Höglund/Kerstin Hamberg. Version 2.0. Granskare Leukemi-Lymfom diagnosgrupp.
Dokumentnamn PM leukemier Utfärdare Martin Höglund/Kerstin Hamberg Granskare Leukemi-Lymfom diagnosgrupp Version 2.0 Datum 2015-03-21 Syftet med U-CAN, är att bygga upp en biobank med blod-, tumör- och
Läs merTentamen i Analytisk kemi II, 02.02.2011
Tentamen i Analytisk kemi II, 02.02.2011 a) Beräkna bireaktionskoefficienten för kadmium ( Cd) i närvaro av ammoniak vid ph = 10 om totalhalten ammoniak är 0.1 M. (3 p) b) Beräkna den konditionella konstanten
Läs merURINPROV. Tvätta och handdesinfektera händerna Ta på handskar Ta på plastförkläde
1 URINPROV Prov lämnas i många olika situationer Urinprov kan behöva lämnas av olika anledningar, till exempel när patienten utreds för sjukdom eller då olika uppföljningar behöver göras. Det är alltid
Läs merDownstream Processing
Downstream Processing 4 huvudsteg i ett reningsförfarande 1. Förfraktionering Avlägsna fasta partiklar, ex celldebris. Sker via centrifugering, filtrering, sedimentering, flockulering Ställa in ph, jonstyrka.
Läs merKILENE AVLOPPSRENINGSVERK. Hammarö kommun
Hammarö kommun Processbeskrivning KILENE AVLOPPSRENINGSVERK Hammarö kommun Process Beskrivning Life projektet LOCAL RECYCLING Hammarö kommun Processbeskrivning Sättersvikens ARV 2007-01-15 I Innehållsförteckning
Läs merAquatron UV brunn. Aquatron International AB Ekebyvägen 4 725 92 Västerås 021-560 20 mail: info@aquatron.se
Aquatron UV brunn Funktion: Funktion Aquatrons UV-enhet utnyttjar både vattnets skruvrörelse som åstadkommes av Meandereffekten samt tröskeleffekten (alla partiklar snurrar runt och belyses på alla sidor
Läs merKoagulationsanalyser. Serumanalyser, används endast i undantagsfall inom landstinget Dalarna.
1(6) Rör för venprovtagning Alla rör ska vändas 5-10 gånger efter provtagning. Rörtyp Ljusblå propp, svart ring Blodvolym/ dragvolym 3 ml Användning Koagulationsanalyser Vfn varukatalog/ Mediq Anmärkning
Läs merBIPACKSEDEL: INFORMATION TILL ANVÄNDAREN. Erbitux 2 mg/ml infusionsvätska, lösning Cetuximab
BIPACKSEDEL: INFORMATION TILL ANVÄNDAREN Erbitux 2 mg/ml infusionsvätska, lösning Cetuximab Läs noga igenom denna bipacksedel innan du börjar använda detta läkemedel. Spara denna information, du kan behöva
Läs merKemisk tipsrunda. Så trodde vi innan experimentet. Station 1 X 2 Hypotes 1
Så trodde vi innan experimentet Station 1 X 2 Hypotes 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 Så blev resultatet av experimentet Försök att förklara resultatet och utveckla gärna något nytt experiment för att
Läs merDatum: Loggschema Linje B (Ytter), se länk badstatus. A ------ B 4-8 p A ------- B 5-10 p A ------- B ------- A ------- B ------- A ------- B -------
Instruktion förbehandling Lessebo 6 Sid 1 av 16 Allmänt: De olika förbehandlingsstegen kontrolleras 1 ggr/skift, vid drift, enligt nedanstående instruktion. Samtliga ärvärden noteras i loggbok. Noteringar
Läs merDNA-analyser: Introduktion till DNA-analys med PCR och gelelektrofores. Niklas Dahrén
DNA-analyser: Introduktion till DNA-analys med PCR och gelelektrofores Niklas Dahrén Användningsområden för DNA-analys Ta reda på vems DNA som har hittats på en brottsplats. Faderskapsanalys. Identifiera
Läs merEgenkontroll för. hemtjänsten i Järfälla kommun. Kostservice 2011, maj
Egenkontroll för hemtjänsten i Järfälla kommun VERKSAMHETEN Namn Adress Tel E-post Org.nr. Verksamhetens art Antal serverade portioner/dag (ca) Frukost Lunch Middag Kvällsmat Antal portioner tillagade
Läs merDatum 131018 Skrivtid 4 tim. Charlotte Sahlberg Bang
Örebro universitet Institutionen för hälsovetenskap och medicin Enheten klinisk medicin Tentamen Kursens namn: BMLV A, Biomedicinsk laboratoriemetodik Kurskod: BL 1015 Kursansvarig: Siw Lunander Datum
Läs merLite fakta om proteinmodeller, som deltar mycket i den här tentamen
Skriftlig deltentamen, FYTA12 Statistisk fysik, 6hp, 28 Februari 2012, kl 10.15 15.15. Tillåtna hjälpmedel: Ett a4 anteckningsblad, skrivdon. Totalt 30 poäng. För godkänt: 15 poäng. För väl godkänt: 24
Läs merManual för administration av Stängda Länkar i BoxOffice
Manual för administration av Stängda Länkar i BoxOffice VP Direct Stängda länkar Användningsområde En försäljningslänk som kan användas för områden nedan: Pre- sale Special pris Riktad försäljning Unika
Läs merOch vad händer sedan?
Och vad händer sedan? I STORT SETT ALLA MÄNNISKOR I SVERIGE SOM BOR i en tätort är anslutna till ett vatten- och avloppsledningsnät. Men så har det inte alltid varit. Visserligen fanns vattenledningar
Läs mer