Detection of mutations in dihydropteroate synthase (dhps) and dihydrofolate reductase (dhfr) in Plasmodium falciparum in eastern Sudan

Storlek: px
Starta visningen från sidan:

Download "Detection of mutations in dihydropteroate synthase (dhps) and dihydrofolate reductase (dhfr) in Plasmodium falciparum in eastern Sudan"

Transkript

1 Institutionen för medicinsk biokemi och mikrobiologi Biomedicinska analytikerprogrammet, 180 hp Examensarbete, 15 hp, VT-11 Detection of mutations in dihydropteroate synthase (dhps) and dihydrofolate reductase (dhfr) in Plasmodium falciparum in eastern Sudan Mariam Nakintu Handledare: Göte Swedberg Institutionen för medicinsk biokemi och mikrobiologi Uppsala universitet

2 ABSTRACT Malaria is one of the most frequent infectious diseases in the world and is mostly found in the tropical and subtropical parts of the world. WHO estimates that there are million malaria cases every year. Malaria is caused by a parasite from the Plasmodium genus and of five species, which can cause infections in humans, of which Plasmodium falciparum is the most pathogenic. In eastern Sudan, the malaria transmission is limited to the three months long rain season, which is followed by nine months of dry season. It is during the dry seasons that an infected person develops an asymptomatic infection. Due to mutations, changes that happen naturally in genes, the malaria parasite has managed to become resistant to all antimalarial drugs that are available today. There are specific mutations in the parasites dhps- and dhfr-genes that are responsible for resistance to the sulfadoxine-phyrimethamine antimalaria drug. The dhps and dhfr enzymes are involved in the parasites folate-synthesis, which is needed for the synthesis of DNA nucleotides during replication. The aim of this study was to use PCR to detect mutations in the dhps- and dhfr-genes in P. falciparum infected patients from eastern Sudan that showed parasitic infection during the rain- and dry season. The result showed mutated parasite clones in the dhps-gene during the dry season. This was surprising because drug treatment was, in the study, limited to the rain season and therefore there should not be any mutant clones. Due to lack of time no analysis where done on the dhfr-gene. Keywords: Sulfdadoxin-Phyrimethamine, malaria resistance, nested-pcr 2

3 INTRODUKTION Malaria är en av mänsklighetens mest frekventa sjukdomar. I över ett sekel med upprepade försök att utrota eller få kontroll över malaria, består sjukdomen som ett stort växande hot mot människans hälsa främst i utvecklingsländer i de tropiska och subtropiska delarna i världen. 40% av jordens befolkning lever i områden där malaria har stor spridning. En uppskattning av antalet malariafall i världen har gjorts till miljoner varje år. Dödssiffran beräknas vara 2,7 miljoner varje år varav 90 % utgörs av barn under 5 år som lever i de subtropiska delarna av världen (Gardner et al., 2002). Malaria är en parasitinfektion som kan drabba människan. Infektionen orsakas av protozoer, encelliga organismer, som tillhör släktet Plasmodium. Inom Plasmodiumsläktet finns det 5 olika Plasmodium-arter som kan orsaka sjukdom hos människan, P. falciparum, P. vivax, P. malariae, P. ovale (Greenwood et al., 2005) och den nyligen upptäckta P. knowlesi (Oddux et al., 2011). Av dessa fem arter är P. falciparum den farligaste. Den orsakar flest allvarliga infektioner och står för största andelen dödsfall av malaria (Greenwood et al., 2005). Spridningen av parasiten sker via honorna av Anopheline myggan (Greenwood et al., 2005). P. falciparums livscykel i människan består av tre stadier. Första stadiet är det pre-erytrocytiska stadiet och inleds då myggan suger ut blod från en människa samtidigt som den sprutar in saliv, som är till för att utvidga och förhindra koagulation i de omkringliggande blodkärlen, i vävnaden under huden eller i vissa fall direkt in i blodbanan. Med myggans saliv sprutas sporozoiter (parasiter), in. Dessa tar sig till levern där de infekterar en del av levercellerna, hepatocyterna. Inne i hepatocyterna utvecklas varje enskild sporozoit till tiotusentals dotterceller, asexuella parasiter även kallade för merozoiter. Det andra stadiet, det asexuella stadiet, i cykeln börjar efter ca 1 vecka då merozoiterna tar sig ut ur levern och in i blodbanan. Det är i det här stadiet som den smittade personen utvecklar symptom för malaria. Väl inne i blodbanan påbörjas merozoitens cykel som består av infektion av erytrocyter, replikation, spräckning av erytrocyter och mer utsläpp av merozoiter ca var 48:e timme. Det tredje och sista stadiet i P. falciparums livscykel i människan sker då en liten del av merozoiterna övergår till sexuell form, gametocyter. Gametocyterna, som ligger kvar i erytrocyten, kan i sin tur fångas upp av nästa mygga som kommer för att suga blod och på så sätt sprids parasiten vidare från människa till människa 3

4 (Crompton et al., 2010). Parasiten genomgår en annan cykel i myggans mage. Där genomgår gametocyterna flera utvecklingsstadier där det sista utvecklingsstadiet är sporozoiter som tar sig från myggans mage till myggans saliv. I Sudan, som i så många andra afrikanska länder, är malaria ett stort problem. Det sker 7,5 miljoner infektioner och dödsfall i landet årligen. Den största andelen infektioner och dödsfall orsakas av P. falciparum (A-Elgayoum et al., 2009). I de östra delarna av Sudan sker smittspridningen under landets ca 3 månader långa regnperiod som följs av en lång torrperiod med bara några enstaka malariafall. Personer som blir smittade under regnperioden utvecklar oftast långvariga asymptomatiska infektioner efter att regnperioden är över (Babiker et al., 1998). I denna typ av infektion kan gametozyterna tas upp av nästa mygga och spridas vidare. Närvaro av P. falciparum i Sudan har medfört resistensutveckling mot malariamedlen. Resistens mot klorokin sågs först på 1980-talet i de östra delarna av Sudan och p.g.a. den ökade resistensutvecklingen har landet bytt till malariamedlet Sulfadoxin-Pyrimetamin (SP) (Babiker et al., 1995). En av de största anledningarna till varför malaria runt om i världen är och har varit svår att få kontroll över är malariaparasitens ökade resistensutveckling mot de antimalariamedel som finns ute på marknaden (Wongsrichanalai et al., 2002). Med resistens mot anti-malariamediciner menas en parasits förmåga att överleva och/eller dela sig trots patientens intag av rekommenderad dos av antimalariamedlet, dock inom patientens toleransnivå (WHO, 2001). Denna överlevnadsförmåga beror på naturligt förkommande punktmutationer, förändringar, i sekvenser i en parasits gener som gör att läkemedlet inte får någon verkan på parasiten. Spridningen av resistens beror på många faktorer såsom utsträckningen av läkemedlets användning, läkemedlets uppbyggnad, mänskliga faktorer såsom människors resande runt om i världen, hur parasiten tar upp läkemedlet, genetiska mutationer hos parasiten och även miljöfaktorer kan påverka resistensutvecklingen. Klorokinresistenta parasiter kan t.ex. överleva bättre i en Anopheline-mygga som lever i Sydamerika jämfört med en mygga som lever i Afrika. (Wongsrichanalai et al., 2002). 4

5 För Plasmodium-arterna har resistens påvisats i P. falciparum och P. vivax. Ingen resistens har dokumenterats för P. malariae och P. ovale (Wongsrichanalai et al., 2002). De antimalariamedel som har använts mest är kinin, klorokin och Sulfadoxin- Pyrimetamin (SP). Kinin är ett av det äldsta och mest kända antimalariamedlen men som dock inte har använts lika frekvent och spritt jämfört med andra antimalariamedel. Det förekommer naturligt i cinochonaträdets bark i Sydamerika och upptäcktes på 1600-talet. Det första resistensfallet rapporterades in i början av talet och sedan dess har enstaka fall av kininresistens rapporterats in. Idag används medlet som andra- eller tredjehandsval för malariabehandling. Klorokin framställdes på 1940-talet och blev snabbt det mest använda och effektivaste syntetiska antimalariamedlet 40 år framåt. Då fler och fler klorokinresistensfall rapporterades in utvecklades nya medel däribland SP. Idag har klorokinresistens rapporterats in överallt från P. falciparum-malariadrabbade områden. Den höga klorokinresistensen har lett till att över 10 afrikanska länder bytt ut sitt förstahands-antimalariamedel, klorokin, till SP (Wongsrichanalai et al., 2002). Kombination av Sulfadoxin och Pyrimetamin framställdes för första gången 1967 och redan samma år rapporterades det första SP-resistensfallet in från de thailändska gränserna. Innan SP-kombinationen användes de båda medlen var för sig. Idag är SPresistensen hög i stora delar av sydöstra Asien och södra Kina. På 1980-talet började man se ökad SP-resistensutveckling över den Afrikanska kontinenten. SP-resistensen sprids allt snabbare bland de malariadrabbade länderna i världen (Wongsrichanalai et al., 2002). P. falciparum är den art som står för största andelen infektioner och dödlighet och är därför den art vars gener det forskats mest om. Gällande antimalariamedel är den genetiska bakgrunden till SP-resistensen den mest undersökta (Wongsrichanalai et al., 2002). Genetiskt finns det två typer av benämningar hos organismer, vildtyp och mutant. Med vildtyp menas en arts naturliga genetiska förekomst. Vildtypen representerar alltså den ursprungliga förekommande genvarianten hos en art. Med mutant menas att det skett en eller flera mutationer i vildtypen. Hos P. falciparum har dessa mutationer lett till resistensutveckling mot olika antimalariamedel. Malariainfekterade patienter 5

6 kan antingen bära på parasiter av typen vildtyp, mutant eller båda två. Bär de på båda har de en så kallad blandinfektion. Specifika mutationer som är kopplade till SP-resistensen hos P. falciparum har identifierats. Sulfadoxin och Pyrimetamin samverkar vilket ger en större effekt än de båda medlen skulle göra separat. Sulfadoxin inhiberar enzymet dihydropteroatsyntetas (dhps) och Pyrimetamin inhiberar enzymet dihydrofolatreduktas (dhfr) i P. falciparum. Genom att inhibera dessa enzymer, som ingår i olika katalytiska steg i parasitens men inte människans folatsyntes, blockeras parasitens möjlighet att tillverka DNA-byggstenar och därmed kan inte DNA replikation ske vid delning. Det har identifierats att punktmutationer vid kodon N51I, C59R, S108N och I164L i dhfrgenen är direkt kopplade till parasitens resistens mot Pyrimetamin där varje punktmutation resulterar i högre grad av resistens. Punktmutationer vid kodon S436A/F, A437G, K540E, A581G och A613T/S i dhps-genen är kopplade till parasitens Sulfadoxinresistens (Ndiaye et al., 2005). Ett helgenomsekvenseringsprojekt för P. falciparum-klonen, 3D7 (vildtyp), har utförts av en grupp forskare. Det 22,8 Mega-baspar (Mb) genomet består av 14 kromosomer och kodar för 5300 gener (Gardner et al., 2002). För detektionen av en muterad P. falciparum klon (DD2) användes 3D7 som referens i denna studie. Snabb och korrekt detektion av en Plasmodium-infektion hos en patient är extremt viktigt i försöken att förhindra svåra infektioner och dödsfall i framförallt de tropiska delarna av världen där en blandinfektion är vanlig (Rosanas-Urgell et al., 2010). Den laboratoriemetod som använts längst för detektion och diagnos av malaria är ljusmikroskopering av en tjock bloddroppe och ett tunt blodutstryk. Med den metoden går det att detektera olika Plasmodium-arter kvantitativt. På senare tid har snabbtestmetoden börjat användas allt oftare ute i fält där det är speciellt viktigt att ställa en snabb diagnos. Med ett malaria-snabbtest detekterar man specifika antigen (proteiner), som malariaparasiten producerar i en infekterad patients blod. För detektion av olika Plasmodium-arter på molekylär nivå används PCR. Metoden gör det även möjligt att detektera olika kloner inom en Plasmodium-art (Rosanas-Urgell et al., 2010). I denna studie används konventionell PCR och nested-pcr för detektion av olika Plasmodium falciparum-kloner. Nested-PCR, dubbel-pcr, innebär att man 6

7 använder sig av två primerpar. Det första primerparet, som basparar till ett specifikt område, används till den första PCR-omgången. Till den andra PCR-omgången används PCR-produkt från den första PCRen och ett nytt primerpar. Detta primerpar basparar till ett område innanför det område som det första primerparet basparat till. Med nested-pcr höjs känsligheten och specificiteten och risken för kontamination minskar. Syftet med denna studie är att detektera mutationer i dhfr- och dhps-generna i P. falciparum infekterade patientprover från östra Sudan, som uppvisat parasitinfektion under både regn- och torrperioden. Man vill ta reda på om proverna innehåller parasiter av typen vildtyp eller en mutant. Detta för att se vilken typ av parasitklon som dominerar och om det finns något mönster. MATERIAL OCH METOD Provmaterial Fryst färdigextraherat DNA från P. falciparum-infekterade patienter från östra Sudan och färdigextraherat DNA från 3D7 (vildtyp) och DD2 (mutant) laboratorieodlade parasitkloner användes. Provmaterialet är från år och har använts i en tidigare studie. Patienterna genomgick klorokinbehandling mot P. falciparuminfektion, under regnperioden, där ett blodprov togs varje månad genom hela regnoch torrperioden (15 månader). Patientproverna i denna studie representerar de patienter, som trots behandling, behöll en parasitinfektion. DNA extraherades från blod på filterpapper enligt Chelexmetoden (Plowe et al., 1995). Detta steg utfördes av en annan gruppmedlem i forskningsgruppen innan denna studie sattes igång. Preparation av 3D7- (vildtyp) och DD2- (mutant) kontroller för dhfr- och dhpsgenerna PCR amplifiering av dhfr-genen Den totala volymen för PCR-mixen var 20µl och innehöll DreamTaq Green buffer (Fermentas), 0,05µM av respektive specifik primer som är riktad mot målsekvensen, pfdhfr1 5 -ATGATGGAACAAGTCTGCGAC-3, pfdhfr2 5-7

8 CTTGATAACAACGGAACCTCC-3 (Eurofins MWG Operon), 0,1mM dntp (Fermentas), 2,5u/ DreamTaq DNA polymerase (Fermentas), samt 2µl DNA-prov. Det program som ställdes in på PCR-maskinen, GeneAmp PCR System 9700 (Applied Biosystems) för dhfr-amplifieringen var denaturering vid 94 o C i 2min, 94 o C i 30sek, annealing vid 50 o C i 1min och elongering vid 72 o C i 1min. Detta upprepades i 25 cykler följt av 72 o C i 10min varefter 4 o. PCR amplifiering av dhps-genen Totalvolymen för PCR-mixen var 20µl och hade samma innehåll som PCR för dhfrgenen bortsett från primer. Amplifikationen av dhps-genen utfördes i två PCRomgångar och programmet som ställdes in var denaturering vid 94 o C i 3min, 94 o C i 1min, annealing vid 51 o C i 2min och elongering vid 72 o C i 1min. Detta upprepades i 25 cykler därefter 74 o C i 10min följt av 4 o C. Till den första PCRen användes primer N218 outer forward 5 -TGATACCCGAATATAAGCATAATG-3 (Eurofins) och N185 outer reverse 5 -ATAATAGCTGTAGGAAGCAATTG-3 (Eurofins). Till den andra PCR-omgången användes primer Rc nested forward 5 - GGTATTTTTGTTGAACCTAAACG-3 (Eurofins) och Rd nested reverse 5 - ATCCAAATTGTGTGATTTGTGGAC-3 (Eurofins). Som DNA-prov togs 2µl av PCR-produkten från första omgångens PCR. Kontroll av PCR amplifiering med agarosgelelektrofores Proverna kördes på en 0,8 %-ig agarosgel som preparerades genom att blanda agarospulver, Agarose ultra pure (Invitrogen), med 1X TBE-buffert (Tris borate EDTA). Därefter togs 40ml av blandningen och 0,07 % etidiumbromid (dropperbottle, Applichem) tillsattes, detta för att senare kunna synliggöra DNA-banden med hjälp av UV-strålning. Spänningen sattes på 90V i 1h varefter gelen lades på ett UV bord och fotograferades för avläsning. Rening av PCR-produkter Reningen av PCR-produkten gjordes enligt medföljande kit manual, GeneJET PCR purification kit #K0701, #K0702 (Fermentas). Detta steg görs för att rena PCR-produkten från eventuellt överskott av t.ex. primer och rektionsbuffert och för att få en koncentrering av produkten. Detta kit bygger på att DNA-sekvensen binds till en hydrofob matris, som tvättas varefter DNA elueras. 8

9 Genkloning Kloningen utfördes enligt medföljande kit manual, CloneJet PCR Cloning Kit #K1231 (Fermentas) Detta steg gjordes för att föra in, ligera, den amplifierade genen i en plasmidvektor som i sin tur kan transformeras in i en bakterie. Transformation Till transformationen, insättningen av plasmidvektorn med det ligerade DNAt in i bakterier, användes E. coli DH5α celler. Dessa preparerades genom att tillsätta en koloni av E. coli DH5α bakterier till 20ml BHI-lösning, Brain heart infusion (OXOID) löst i destillerat H 2 O. Lösningen sattes på skak i 37 o C så bakterierna kunde växa till sig upp till en turbiditet på 0,35-0,40 vid 600nm. Lösningen centrifugerades, i 10min på 4000xg varefter supernatanten hälldes av och 10mL kyld 50mM, ph 8,0 kalciumklorid tillsattes. Bakterielösningen sattes på is i 15min och centrifugerades sedan i ytterligare 10min på 4000xg. Supernatanten hälldes av och ytterligare 2mL kyld 50mM, ph 8,0 kalciumklorid tillsattes. Blandningen hölls på is tills den användes. Till 200µl av E. Coli-bakterielösningen tillsattes 10µl ligeringsmix (plasmidvektor med ligerat fragment). Sedan utfördes en värmechock, för att bakterierna skulle ta upp plasmiden, genom att lösningarna lades på is i 30min och därefter i ett 42 o C värmeblock i 2min. Efter inkubationen tillsattes 1ml LB-medium, LB BROTH LENNOX (CONDA) och lösningen inkuberades i 37 o C i 1tim. Efter inkubationen centrifugerades lösningen, i 3min på 3000xg för att samla bakterierna i rörens botten. Supernatanten hälldes av och bakteriepelleten resuspenderades i vätskan som blev kvar i rören. Dessa racklades sedan ut på agarplattor innehållande ampicillin (50µg/ml) och inkuberades i 37 o C över natten. Koloni-PCR (kontroll av transformationen) 6-8 bakteriekolonier valdes slumpmässigt ut från de inkuberade plattorna från föregående dag för att testa om insättningen av det ligerade DNAt lyckats. Detta gjordes genom att köra en PCR. PCRen kördes med samma program som vid PCRamplifieringen av dhfr- och dhps-generna och med samma antal cykler. Dock användes andra primrar, 1µl 10µM pjet1.2 forward 5-9

10 CGACTCACTATAGGGAGAGCGGC-3 (Fermentas) och 1µl 10µM pjet1.2 reverse 5 -AAGAACATCGATTTTCCATGGCAG-3 (Fermentas) för denna PCRanalys. Dessa primrar binder till vektorn vilket gör att det går att ta reda på om bakterierna tagit upp plasmiden eller inte och om fragmentet ligerats in korrekt. Proverna kördes på en 0,8 %-ig agarosgel som preparerades på samma vis som vid kontroll av PCR-amplifieringen av dhfr- dhps-generna. Klyvning av DNA fragment med restriktionsenzym Innan klyvningen gjordes en rening av PCR-produkterna på samma sätt som tidigare. För klyvningen av dhfr-genen med restriktionsenzymet, TaqI (Fermentas), som klyver mutanten vid R59, tillsattes 2µl 10X Buffer TaqI med BSA (Fermentas), 10µl renad PCR-produkt, 12µl H 2 O och 0,5µl 10u/µl TaqI. Till Tsp509I (Fermentas), som klyver vildtypen vid I51, tillsattes 2,5µl 10X Buffer B med BSA (Fermentas), 10µl renad PCR-produkt, 12µl H 2 O och 0,5µl 10u/µl Tsp509I. Proverna inkuberades i 62 o C i 1tim. Till klyvningen av dhps-genen med restriktionsenzymet 10u/µl AvaII (Fermentas) som klyver både vildtyp och mutant vid kodon G437 och restriktionsenzymet 10u/µl FokI (Fermentas) tillsattes 2,5µl 10X Buffer R med BSA (Fermentas), 10µl renad PCR-produkt, 12µl H 2 O och 0,5µl AvaII. Proverna inkuberades i 37 o i 1h. Proverna för dhfr-genen kördes på en 2 %-ig agarosgel och proverna för dhps-genen kördes på en 0.8 %-ig agarosgel som förbereddes på samma sätt som tidigare varefter gelen lades på ett UV bord och fotograferades för avläsning. Plasmidpreparation Plasmidpreparationen gjordes enligt medföljande kit manual GeneJET Plasmid miniprep kit #K0502, (Fermentas). Detta steg görs för att rena plasmiderna, med det ligerade fragmentet, från E. colibakterierna så man får fram en lösning med bara plasmider som kan användas som kontroller vid analys av patientprover. 10

11 Analys av patientprover Analysmetoden för patientproverna gick till på samma sätt som metoden för preparationen av kontrollerna dock i en annan ordning. Först utfördes PCR för amplifiering, därefter agaros-gel-elektrofores, rening av PCRprodukt, klyvning med restriktionsenzym och agaros-gel-elektrofores som kontroll för klyvningen. För de prover som inte gav starka band på gelen gjordes en transformation, koloni-pcr, gel-elektrofores, rening av PCR-produkt och sist klyvning med restriktionsenzym varefter resultatet noterades. RESULTAT Preparation av 3D7- (vildtyp) och DD2- (mutant) kontroller för dhps- och dhfrgenen. För att kunna undersöka om det finns muterade parasitkloner i patientproverna måste kontroller för vildtypen och mutanten göras. Första delen av projektet gick ut på att preparera dessa kontroller genom att isolera målsekvensen där mutationen finns och använda sig av restriktionsenzym för klyvning vid olika kodon där mutationerna finns. Kontroller gjordes för både dhps- och dhfr-genen. Först preparerades 3D7- och DD2-kontrollerna för dhfr-genen. Klyvningen av vildtypen och mutanten skedde med restriktionsenzymerna TaqI som klyver mutanten, och Tsp509I som klyver vildtypen. Fig 1. visar resultatet för klyvningen av dhfr-genen. Därefter preparerades 3D7- och DD2-kontroller för dhps-genen. Till klyvningen användes restriktionsenzymet AvaII som klyver både vildtyp och mutant vid kodon G437. Fig 2. visar resultatet för klyvningen av dhps-genen. För DD2-kontrollen för dhfr-genen upprepades alla stegen i metoden 4 gånger då det inte skett någon bakterietillväxt efter varje transformation. Alla stegen utfördes på samma sätt med samma material. Vid det fjärde försöket av PCR-analysen, för kontroll av transformationen, byttes DreamTaq Green Buffer (Fermentas) ut mot Pfu Buffert med MgSO 4 (Fermentas) och DreamTaq DNA polymeras (Fermentas) byttes ut mot Pfu DNA Polymeras rekombinant (Fermentas). Detta för att Pfu DNA polymeraset är stabilare jämfört med DreamTaq DNA polymeraset. Detta gav resultat. 11

12 Figur 1. Klyvning av 3D7- (vildtyp) och DD2- (mutant) med TaqI och Tsp509I för dhfr-genen. Sista provet är en kontroll som består av okluvet DD2-prov. 1= 3D7(3)-TaqI, 3= 3D7(4)-TaqI, 6= DD2(2)Tsp509I, 7=DD2(5)-TaqI. Siffrorna inom parentes representerar de utvalda bakteriekolonier som tagit upp plasmidvektorn. 2=3D7(3), 4=3D7(4), 5=DD2(2), 8=DD2(5), 9=kontroll-DD2 utan restriktionsenzym. Figur 2. Klyvning av 3D7 och DD2 med AvaII för dhps-genen. Banden till vänster om storleksmarkör 1, 1 kbp-stege (Fermentas), representerar utvalda bakteriekolonier för 3D7-proverna. Banden till vänster om storleksmarkör 2 representerar utvalda bakteriekolonier för DD2 proverna. 12

13 Analys av patientprover Syftet med studien var att detektera mutationer i dhps- och dhfr-genen i P. falciparum-infekterade patienter med hjälp av restriktionsenzym som klyver vid specifika kodon. Tab 1 visar resultatet för upptäckta mutationer i dhps-genen vid kodon G437 Tabell 1. Detektion av mutationer i dhps-genen vid kodon G437. Patient nr Månads nr dhps VT/MT 30 2 VT 30 3 VT 30 4 Ingen PCR-produkt 30 5 Ingen PCR-produkt 30 6 VT 30 7 VT 30 8 VT 30 9 VT VT Ingen PCR-produkt 34 3 VT 34 5 VT 34 6 VT 34 7 VT 34 8 MT 34 9 MT MT VT VT Ingen PCR-produkt Ingen PCR-produkt VT står för vildtyp och MT står för mutant 13

14 För några av proverna kunde inte tillräckligt med DNA amplifieras vid PCRkörningen och kunde därför inte analyseras. Pågrund av tidsbrist gjordes inga analyser på dhfr-genen. DISKUSSION Malaria infektioner har blivit allt svårare att behandla pga. av malariaparasitens resistensutveckling mot de antimalariamedel som finns ute på marknaden idag. Resistensutvecklingen beror på mutationer i parasitens gener som gör att medlet inte längre är verksamt mot parasiten. För att kunna detektera muterade parasitkloner använder man sig av PCR-metoden, för att få en stor mängd av mål-sekvensen och restriktionsenzym som klyver vid specifika kodon i DNA-sekvensen där mutationerna finns. Vid analysen av patientprover måste kontroller för vildtypen och mutanten finnas. Vid preparationen av kontrollerna var det speciellt svårt att få till en lyckad transformation för DD2-kontrollen för dhfr-genen. En förklaring till detta kan vara att den extraherade DNA-mängden för DD2 var mindre jämfört med DNA-mängden för 3D7. Detta gav en mindre mängd PCR-produkt att arbeta vidare med. Problemet åtgärdades genom att ta DNA-extrakt från ett annat DD2-originalprovrör och byta ut DNA-polymeras till ett mer stabilare enzym (se Kontroll av koloni-pcr med agarosgelelektrofores i material och metod). Detta gav bättre resultat. En anledning till problemen kan vara att provmaterialet i det första orginalprovröret med extraherat DNA förstörts efter upprepad upptining och nedfrysning. Klyvningen av 3D7 och DD2 för dhfr-genen lyckades, dock blev resultaten inte som förväntat. I teorin klyver TaqI DD2 (mutant) och Tsp509I klyver 3D7 (vildtyp) men när klyvningen utfördes blev resultatet annorlunda. I Figur 1. ses resultatet för klyvningen. Där kan man se att 3D7 klövs av TaqI och DD2 klövs av både TaqI och Tsp509I. Detta innebar att teori och praktik inte stämde överens men att kontroller för vildtyp och mutant fåtts fram. Den sannolika förklaringen till resultatet är att proverna blandades ihop någonstans under metodens gång och att en kontamination har skett för det DD2-prov som klövs som både mutant och vildtyp. Resultatet i Figur 2. visar att både 3D7 och DD2 klövs av AvaII för dhps-genen vilket också var förväntat då båda klonerna har G437. Av de patientprover som klövs av AvaII borde fortsatt analys göras i form av sekvensering för att bekräfta om provet innehåller vildtypklon eller mutantklon. Resultatet i Figur 2. visar även 3D7 och DD2 14

15 kloner som inte kluvits av restriktionsenzymet FokI. Detta berodde på de båda klonerna inte har det kodon där FokI klyver vid. På grund av att det tog längre tid än väntat att preparera kontrollerna gjordes ingen analys av dhfr-genen i patientmaterialet. Tabell 1. visar därför bara analysresultaten för patientproverna vad gäller dhps-genen. Resultatet av två patientprover visar att prov från patient nr 30 bara innehöll vildtypklonen av P. falciparum under hela perioden medan patient nr 34 innehöll både vildtyp och muterad parasitklon. Mutantklonen hos patient 34, ses under en 3 månadersperiod varefter vildtypklonen ses igen. I den tidigare studien som patienterna ingick i, genomgick de behandling under de 3 första inledande månaderna, regnperioden. Då de inte längre uppvisade några symptom och inga parasiter kunde påvisas i mikroskop under torrperioden avslutades behandlingen. Det resultat som fåtts fram, att patienten bär på resistenta mutantkloner, är därför överraskande. Resultatet leder till funderingar kring hur det kommer sig att patienten plötsligt uppvisar muterade parasitkloner i blodet trots frånvaro av antimalariabehandling. Är det något som händer i kroppen hos patienten eller rör det sig om spridning av mutantkloner från andra infekterade personer eller har den misslyckade behandlingen lett till att mutantparasiter uppstått dvs. har den korta närvaron av antimalariamedel lett till muterade parasitkloner? Om vidare analyser av fler patientprover kunnat göras skulle detta kunna ge en tydligare bild av om det finns ett mönster. Är det många patienter som uppvisar mutantkloner? Det finns en liknande studie som gjorts tidigare i Senegal, som visar att en kombination av mutationer i dhps-genen och mutationer i dhfr-genen leder till en ökad misslyckad SP-behandling (Ndiaye et al., 2005), alltså en ökad resistensutveckling. Om analyser gjorts på dhfr-genen i denna studie så kanske resultatet hade visat samma mönster och fler mutantkloner i båda generna hittas hos fler patienter. I denna studie användes PCR-metoden för detektion av olika parasitkloner och mutationer i dessa. Den traditionella metoden som använts längst för att diagnostisera en malariainfektion är ljusmikroskopi. Med denna metod undersöks ett färgat 15

16 blodutstryk från patienten i ett ljusmikroskop. Fördelen med denna metod jämfört med en molekylär metod, PCR, är lägre analyskostnader, enkel preparation av prover och så går det att göra en artbestämning och även se vilket stadium parasiten befinner sig i. Nackdelen med metoden är den stora risken för falskt negativ diagnos vid låg parasitkoncentration i blodet och felidentifiering av parasitart. Ljusmikroskopering tillåter heller ingen identifiering av olika parasitkloner, dvs. om det rör sig om en vildtyp eller mutant eller blandinfektion. Detta går att upptäcka med PCR-metoden, speciellt nested-pcr. En annan fördel med PCR-metoden är att metoden har högre känslighet jämfört med ljusmikroskopering. Hos patienter med en asymptomatisk infektion eller patienter som genomgått en antimalariabehandling och sedan blivit symptomfria är det oftast svårt att upptäcka parasiter i blodet med hjälp av ljusmikroskopering. Detta betyder att det är för få parasiter i blodet för att kunna upptäckas i mikroskop men tillräckligt för att upptäcka med hjälp av PCR. Dock finns det nackdelar med PCR-metoden också såsom höga analyskonstader, dyr analysutrustning, långa analystider för proverna och ökad risk för kontamination. Dessutom är metoden inte kvantitativ. Snabb diagnostik är nödvändig för att minska dödligheten i malaria och p.g.a. detta har snabbtest börjat användas mer och mer ute i fält i utvecklingsländer. Med ett malaria-snabbtest detekteras specifika antigen (proteiner), som malariaparasiten producerar, i en infekterad patients blod. Fördelen med detta test, förutom att det ger möjlighet till en snabb diagnos på plats, är att det inte behövs någon provförberedelse vilket det behövs med de andra metoderna. Dock begränsas metoden av att det inte är möjligt att detektera någon annan parasitart än P. falciparum (Rosanas-Urgell et al., 2010, Ochola et al., 2006, Hassanpour et al., 2011). Idag finns det inget antimalariamedel som är tillräckligt effektivt för att kunna användas som behandlingsform till de svåraste malariainfektionerna. Mer forskning kring bl.a. mutationer i parasitens gener behövs för att på så sätt kunna utveckla ett antimalariamedel som ger en effektivare behandling än den som finns idag. Dessutom behövs utveckling av olika metoder som t.ex. PCR-metoden så det blir möjligt att utföra analyserna på kortare tid och även utveckla bligare material som behövs så att de värst drabbade, utvecklingsländerna, kan använda sig av denna metod och därmed kunna diagnostisera fler personer vilket leder till att behandling sätts in snabbare och fler kan bli fria från sin infektion. 16

17 REFERENSER A-Elgayoum, El-Feki Ael-K, Mahgoub BA, et al., 2009, Malaria over diagnosis and burden of malaria misdiagnosis in the suburbs of central Sudan: special emphasis on artemisinin-based combination therapy era, Diagnostic microbiology and infectious disease, May;64(1):20-6 Babiker HA, Abdel-Muhsin AM, Ranford-Cartwright LC, et al., 1998, Characteristics of Plasmodium falciparum parasites that survive the lengthy dry season in eastern Sudan where malaria transmission is markedly seasonal, The American journal of tropical medicine and hygiene, Oct;59(4): Babiker HA, Satti G, Walliker D, 1995, Genetic changes in the population of Plasmodium falciparum in a three-year period, The American journal of tropical medicine and hygiene, jul;53(1):7-15 Crompton PD, Pierce SK, Miller LH, 2010, Advance and challenges in malaria vaccine development, The journal of clinical investigation, Dec 1;120(12): Gardner MJ, Hall N, Fung E, et al., 2002, Genome sequence of the human malaria parasite Plasmodium falciparum, Nature, Oct 3;419(6906): Greenwood BM, Bojang K, Whitty CJ, Targett GA, 2005, Malaria, Lancet, Apr 23-29;365(9469): Hassanpour G, Mohebali M, Raeisi A et al., 2011, Detection of malaria infection in blood transfusion: a comparative study among real-time PCR, rapid diagnostic test and microscopy: Sensitivity of malaria detection methods in blood transfusion, Parasitology research, Jan 8 [Epub ahead of print] Ndiaye D, Daily JP, Sarr O, et al., 2005, Mutations in Plasmodium falciparum dihydrofolate reductase and dihydropteorate synthase genes in Senegal, Tropical medicine and international health, Nov 10;(11): Ochola LB, Vounatsou P, Smith T et al., 2006, The reliability of diagnostic techniques in the diagnosis and management of malaria in the absence of a gold standard, The lancet infectious diseases, Sep 6;(9):582-8 Oddux O, Debourgogne A, Kantele A, et al., 2011, Identification of the five human Plasmodium species including P. knowlesi by real-time polymerase chain reaction, European journal of clinical microbiology & infectious diseases, Apr 30;(4): Plowe CV, Djimde A, Bouare M, et al., 1995, Pyrimethamine and proguanil resistance-conferring mutations in Plasmodium falciparum dihydrofolate reductase:

18 polymerase chain reaction methods for surveillance in Africa, The American journal of tropical medicine and hygiene, Jun;52(6):565-8 Rosanas-Urgell A, Mueller D, Betuela I, et al., 2010, Comparison of diagnostic methods for the detection and quantification of the four sympatric Plasmodium species in field samples from Papua New Guinea, Malaria journal, Dec 14;9:361 WHO, Drug resistance in malaria, WHO/CDS/CSR/DRS/ Wongsrichanalai C, Pickard AL, Wernsdorfer WH, Meshnick SR, 2002, Epidemiology of drug-resistant malaria, The lancet infectious diseases, Apr 2;(4):

LAB 12. Preparation och analys av plasmid-dna från E.coli

LAB 12. Preparation och analys av plasmid-dna från E.coli Institutionen för biokemi och biofysik LAB 12 Preparation och analys av plasmid-dna från E.coli Basåret 2012 (finns på basårshemsida: www.kemi.su.se, välj Basår) INTRODUKTION I denna laboration ska vi

Läs mer

Genkloning och PCR av tetracyklinresistensgen. från pacyc184 till puc19

Genkloning och PCR av tetracyklinresistensgen. från pacyc184 till puc19 Umeå Universitet Biomedicinska analytikerprogrammet Genkloning och PCR av tetracyklinresistensgen från pacyc184 till puc19 Årskull: Laborationsrapport i Molekylärbiologisk laboratoriemetodik, termin 3

Läs mer

Tillämpning av olika molekylärbiologiska verktyg för kloning av en gen

Tillämpning av olika molekylärbiologiska verktyg för kloning av en gen IFM/Kemi Linköpings Universitet September 2011/LGM Projektlaboration i genteknik Tillämpning av olika molekylärbiologiska verktyg för kloning av en gen Innehållsförteckning Inledning... 3 Amplifiering

Läs mer

Diagnosticera sicklecellsanemi med DNA-analys. Niklas Dahrén

Diagnosticera sicklecellsanemi med DNA-analys. Niklas Dahrén Diagnosticera sicklecellsanemi med DNA-analys Niklas Dahrén Sicklecellsanemi Erytrocyterna ser ut som skäror : Sjukdomen innebär a0 de röda blodkropparna (erytrocyterna) ser ut som skäror (eng. sickle)

Läs mer

DNA-labb / Plasmidlabb

DNA-labb / Plasmidlabb Översikt DNA-labb Plasmidlabb Preparation och analys av -DNA från Escherichia coli Varför är vi här idag? Kort introduktion till biokemi och rekombinant DNA- teknologi Vad skall vi göra idag? Genomgång

Läs mer

Polymerase Chain Reaction

Polymerase Chain Reaction Polymerase Chain Reaction The Polymerase Chain Reaction Molekylärbiologisk metodik T3 ht 11 Märit Karls Kunskapsmål för detta avsnitt Från kursplan: Studenten skall kunna: förklara grundläggande principer

Läs mer

Malaria och Babesia Likheter och skillnader. Kristina E M Persson Region Skåne Lunds Universitet kristina.persson@med.lu.se

Malaria och Babesia Likheter och skillnader. Kristina E M Persson Region Skåne Lunds Universitet kristina.persson@med.lu.se Malaria och Babesia Likheter och skillnader Kristina E M Persson Region Skåne Lunds Universitet kristina.persson@med.lu.se Malaria och Babesia Gathany Krisp Parasiter som bor inuti röda blodkroppar K Persson

Läs mer

Är det möjligt att eliminera malaria från Zanzibar? - ett pilotprojekt för Afrika söder om Sahara

Är det möjligt att eliminera malaria från Zanzibar? - ett pilotprojekt för Afrika söder om Sahara Är det möjligt att eliminera malaria från Zanzibar? - ett pilotprojekt för Afrika söder om Sahara 2 3 MSB:s kontaktpersoner: Sara Brunnberg, 010-240 4087 Publikationsnummer MSB918- september 2015 4 5 Innehållsförteckning

Läs mer

Linköpings Universitet. Laboration i genteknik

Linköpings Universitet. Laboration i genteknik IFM/Kemi Linköpings Universitet Maj 2008/LGM Laboration i genteknik Restriktionskarta av pcantab Restriktionsklyvning samt separation av DNA-fragment mha agarosgelelektrofores Material: pcantab (minst

Läs mer

Detektion av Borrelia burgdorferi IgG. med hjälp av ELISA

Detektion av Borrelia burgdorferi IgG. med hjälp av ELISA Umeå Universitet Biomedicinska analytikerprogrammet Detektion av Borrelia burgdorferi IgG med hjälp av ELISA Årskull: Laborationsrapport i immunologi termin 3 Laborationsdatum: Inlämnad: Godkänd: Handledare:

Läs mer

Linköpings Universitet. Lägesspecifik Mutagenes av proteiner

Linköpings Universitet. Lägesspecifik Mutagenes av proteiner IFM/Kemi Linköpings Universitet Augusti 2007/LGM Lägesspecifik Mutagenes av proteiner Lägesspecifik mutagenes Introduktion In vitro lägesspecifik mutagenes är en ovärderlig teknik för att t.ex. studera

Läs mer

Linköpings Universitet. Lägesspecifik mutagenes av proteiner

Linköpings Universitet. Lägesspecifik mutagenes av proteiner IFM/Kemi Augusti2011/LGM Linköpings Universitet Lägesspecifik mutagenes av proteiner Figur1. Flödesschema över lägesspecifik mutagenes laboration. Lägesspecifik mutagenes Introduktion In vitro lägesspecifik

Läs mer

TFKE32/TFKI09/9KEA21. Laboration i Genteknik

TFKE32/TFKI09/9KEA21. Laboration i Genteknik TFKE32/TFKI09/9KEA21 Laboration i Genteknik Denna laboration består av tre delar: A. Restriktionsklyvning av plasmiden pcantab samt konstruering av restriktionskarta. B. Preparation av plasmiden pcantab

Läs mer

/LGM. Amplifiering och analys av humant mitokondrie-dna med hjälp av PCR teknik och agarosgelelektrofores

/LGM. Amplifiering och analys av humant mitokondrie-dna med hjälp av PCR teknik och agarosgelelektrofores 2008-01-18/LGM Amplifiering och analys av humant mitokondrie-dna med hjälp av PCR teknik och agarosgelelektrofores Syfte: Med två olika DNA extraktionsmetoder försöka få fram tillräckligt mycket celler

Läs mer

Tillämpning av olika molekylärbiologiska verktyg för kloning av en gen

Tillämpning av olika molekylärbiologiska verktyg för kloning av en gen IFM/Kemi Linköpings Universitet September 2004/LGM Projektlaboration i genteknik Tillämpning av olika molekylärbiologiska verktyg för kloning av en gen Innehållsförteckning Inledning... 3 Amplifiering

Läs mer

DNA-analyser: Introduktion till DNA-analys med PCR och gelelektrofores. Niklas Dahrén

DNA-analyser: Introduktion till DNA-analys med PCR och gelelektrofores. Niklas Dahrén DNA-analyser: Introduktion till DNA-analys med PCR och gelelektrofores Niklas Dahrén Användningsområden för DNA-analys Ta reda på vems DNA som har hittats på en brottsplats. Faderskapsanalys. Identifiera

Läs mer

Malaria dödar över 1 miljon människor varje år Genetisk kartläggning av parasit och mygga ger hopp om vaccin och effektivare läkemedel

Malaria dödar över 1 miljon människor varje år Genetisk kartläggning av parasit och mygga ger hopp om vaccin och effektivare läkemedel Klinik och vetenskap Ulrika Kahl, doktor i neurokemi och neurotoxikologi; webbansvarig, Human Brain Informatics samt institutionen för medicinsk epidemiologi, Karolinska institutet, Stockholm (Ulrika.Kahl@mep.ki.se)

Läs mer

Genkloning och PCR av tetracyklinresistensgen från pacyc184

Genkloning och PCR av tetracyklinresistensgen från pacyc184 Umeå Universitet Biomedicinska analytikerprogrammet Genkloning och PCR av tetracyklinresistensgen från pacyc184 Årskull: Laborationsrapport i molekylärbiologisk labmetodik, termin 4 Laborationsdatum: Inlämnad:

Läs mer

Expression, produktion och rening av Fatty acid binding protein (FABP) från ökenmyran Cataglyphis fortis

Expression, produktion och rening av Fatty acid binding protein (FABP) från ökenmyran Cataglyphis fortis UNIVERSITETET I LINKÖPING Proteinkemi Kemiavdelningen 2011-02-04 Expression, produktion och rening av Fatty acid binding protein (FABP) från ökenmyran Cataglyphis fortis Produktion av FABP i E. coli bakterier

Läs mer

Slutrapport - Förstudie om Alternariaförekomst i potatis och behandlingseffekter 2013 i Mellansverige.

Slutrapport - Förstudie om Alternariaförekomst i potatis och behandlingseffekter 2013 i Mellansverige. 1 Slutrapport - Förstudie om Alternariaförekomst i potatis och behandlingseffekter 2013 i Mellansverige. Lisa Andrae, Rådhuset Nordfalan Eva Edin, Institutionen för Skoglig mykologi och växtpatologi, SLU

Läs mer

DNA-analyser: Diagnosticera cystisk fibros och sicklecellanemi med DNA-analys. Niklas Dahrén

DNA-analyser: Diagnosticera cystisk fibros och sicklecellanemi med DNA-analys. Niklas Dahrén DNA-analyser: Diagnosticera cystisk fibros och sicklecellanemi med DNA-analys Niklas Dahrén Diagnosticera cystisk fibros med DNA-analys Cystisk fibros Vad innebär sjukdomen?: Sjukdomen innebär att de epitelceller

Läs mer

Laboration v.40 Detektion av Legionella pneumophilia med nestad PCR

Laboration v.40 Detektion av Legionella pneumophilia med nestad PCR Avdelningen för kemi och biomedicin Karlstads universitet Laboration v.40 Detektion av Legionella pneumophilia med nestad PCR Frågeställning: Vattenlednings system med tillväxt av Legionella pneumophilia

Läs mer

-likheter och skillnader

-likheter och skillnader Malaria och Babesia -likheter och skillnader Maria Lundberg Infektionskliniken Akademiska sjukhuset Uppsala 4 mars 2016 Malaria Blodprotozo - sprids med Anopheles-myggor, via blodtransfusion, nålar, flygplatsmalaria.

Läs mer

Förbättrad bekämpning av HIV resistens i Afrika och Sverige. Professor Anders Sönnerborg

Förbättrad bekämpning av HIV resistens i Afrika och Sverige. Professor Anders Sönnerborg Förbättrad bekämpning av HIV resistens i Afrika och Sverige Professor Anders Sönnerborg 2 MSB:s kontaktpersoner: Sara Brunnberg 010-240 4087 Publikationsnummer: MSB1000 - april 2016 3 Förord Humant immunbrist

Läs mer

Erik Eriksson VMD Enheten för Bakteriologi

Erik Eriksson VMD Enheten för Bakteriologi Diagnostik VTEC/EHEC Erik Eriksson VMD Enheten för Bakteriologi SVA Tänker prata om VTEC / EHEC Sjukdomsframkallande faktorer PCR Magnetiska kulor (Immunomagnetisk separation) Diagnostik de vanligaste

Läs mer

Fakta om kronisk myeloisk leukemi (KML) sjukdom och behandling

Fakta om kronisk myeloisk leukemi (KML) sjukdom och behandling Fakta om kronisk myeloisk leukemi (KML) sjukdom och behandling Om leukemier Kronisk myeloisk leukemi (KML) är en form av leukemi ett samlande begrepp för flera cancersjukdomar som angriper de blodbildande

Läs mer

Solgerd Gotvik. Nybliven pensionär

Solgerd Gotvik. Nybliven pensionär 2014-10-03 Solgerd Gotvik Nybliven pensionär När jag blickar tillbaka och ser att jag har varit 49 år i sjukvården på Gotland, så blir jag lite nostalgisk och undrar, vart tog åren vägen?? Under åren har

Läs mer

Genetisk testning av medicinska skäl

Genetisk testning av medicinska skäl Genetisk testning av medicinska skäl NÄR KAN DET VARA AKTUELLT MED GENETISK TESTNING? PROFESSIONELL GENETISK RÅDGIVNING VAD LETAR MAN EFTER VID GENETISK TESTNING? DITT BESLUT Genetisk testning av medicinska

Läs mer

Kryptosporidier parasiter som angår oss alla!

Kryptosporidier parasiter som angår oss alla! DJURVÄLFÄRD & UTFODRING SVENSK MJÖLK SAMLAR BRANSCHEN parasiter som angår oss alla! 1 & Charlotte Silverlås 1,2 camilla.bjorkman@slu.se 1 Inst. för kliniska vetenskaper, Sveriges lantbruksuniversitet (SLU),

Läs mer

Genetik en sammanfattning

Genetik en sammanfattning Genetik en sammanfattning Pär Leijonhufvud $\ BY: 3 februari 2015 C Innehåll Inledning 2 Klassisk genentik 2 Gregor Mendel munken som upptäckte ärftlighetens lagar....... 2 Korsningsrutor, ett sätt att

Läs mer

Molekylärbiologisk diagnostik av tarmparasiter

Molekylärbiologisk diagnostik av tarmparasiter Molekylärbiologisk diagnostik av tarmparasiter Vad, När, Var och Hur? Jessica Ögren Länssjukhuset Ryhov Juni 2012 Molekylärbiologiska metoder De senaste två decennierna har molekylärbiologiska tekniker

Läs mer

Mikrobiologins tekniksprång Dr. Erik Nygren SP Food and Bioscience

Mikrobiologins tekniksprång Dr. Erik Nygren SP Food and Bioscience Mikrobiologins tekniksprång Dr. Erik Nygren SP Food and Bioscience Mikrobiologins tekniksprång Den högteknologiska mikrobiologin erbjuder idag nya verktyg för att förebygga smittspridning och öka produktsäkerhet.

Läs mer

Immunteknologi, en introduktion. Hur man använder antikroppar för att mäta eller detektera biologiska händelser.

Immunteknologi, en introduktion. Hur man använder antikroppar för att mäta eller detektera biologiska händelser. Immunteknologi, en introduktion Hur man använder antikroppar för att mäta eller detektera biologiska händelser. Antikroppar genereras av b-lymphocyter, som är en del av de vita blodkropparna Varje ursprunglig

Läs mer

En studie över förekomsten av genuttryck för enzym i biosyntesen av malarialäkemedlet artemisinin hos Artemisia vulgaris och Artemisia absinthium

En studie över förekomsten av genuttryck för enzym i biosyntesen av malarialäkemedlet artemisinin hos Artemisia vulgaris och Artemisia absinthium Fakulteten för hälso- och livsvetenskap Examensarbete En studie över förekomsten av genuttryck för enzym i biosyntesen av malarialäkemedlet artemisinin hos Artemisia vulgaris och Artemisia absinthium 1

Läs mer

Ökad kunskap om importerad malaria nödvändig. Sammandrag. Inledning och bakgrund

Ökad kunskap om importerad malaria nödvändig. Sammandrag. Inledning och bakgrund Ökad kunskap om importerad malaria nödvändig Elin Carlsson Exekutiv sammanfattning av Självständigt arbete i biologi VT 2009 Institutionen för Biologisk Grundutbildning, Uppsala Universitet Sammandrag

Läs mer

Gymnasieskolan Knut Hahn Projektrapport - Anna Goos

Gymnasieskolan Knut Hahn Projektrapport - Anna Goos - Anna Goos Innehållsförteckning Inledning Sida 2 Syfte Sida 3 Teori Sida 3-5 Vad är ESBL? Sida 3 Hur hittar man ESBL (hur screenar man efter ESBL-producerande bakterier)? Sida 3 Vad är lappdiffusion?

Läs mer

Inför nationella proven i Biologi

Inför nationella proven i Biologi Inför nationella proven i Biologi Natur och samhälle Hur människan påverkar naturen lokalt och globalt: t.ex. växthuseffekt, nedskräpning miljöfarliga ämnen, övergödning, försurning Under sommaren drabbas

Läs mer

Användning av PCR i växtodlingen. Anders Jonsson, SLU/ JTI, Skara

Användning av PCR i växtodlingen. Anders Jonsson, SLU/ JTI, Skara Användning av PCR i växtodlingen Anders Jonsson, SLU/ JTI, Skara Innehåll Introduktion qpcr och andra DNA-metoder Biologisk markkartering av jordburna patogener DNA-baserade diagnos av bladfläckar på vete

Läs mer

Hur ser det ut i Sverige? HIV. Nära 7 000 personer lever med hiv idag, 60% män 40% kvinnor, hälften i Stockholms län.

Hur ser det ut i Sverige? HIV. Nära 7 000 personer lever med hiv idag, 60% män 40% kvinnor, hälften i Stockholms län. HIV Grundutbildning för lokalt smittskydd och strama ansvariga sjuksköterskor och läkare 14 april 2016 Inger Zedenius sjuksköterska Global estimates for adults and children 2014 People living with HIV

Läs mer

Chagas sjukdom: Aktuell serologisk diagnostik

Chagas sjukdom: Aktuell serologisk diagnostik Chagas sjukdom: Aktuell serologisk diagnostik Användarmöte för Transfusionsmedicin Equalis, oktober 23 2013 Silvia Botero-Kleiven Leg. Läkare, Med. Dr. Parasitologisk Diagnostik (DV-D) PAHO: kontroll av

Läs mer

Namn: student x & student y Kurs: FAGBH0 Utförd: 090526

Namn: student x & student y Kurs: FAGBH0 Utförd: 090526 Laboration: Isolering av kinin Namn: student x & student y Kurs: FAGBH0 Utförd: 090526 Handledare: Patrik Holm 1 Innehållsförteckning Innehållsförteckning... 2 Sammanfattning... 3 Inledning... 3 Utförande...

Läs mer

Cancer som en ämnesomsättningssjukdom del 1

Cancer som en ämnesomsättningssjukdom del 1 Cancer som en ämnesomsättningssjukdom del 1 Artiklarna skrivna av Dr Georgia Ede (översättning S E Nordin) Thomas Seyfried PhD, en hjärncancerforskare med över 25 års erfarenhet inom området, gav en banbrytande

Läs mer

Kopiera DNA med hjälp av PCR-metoden. Niklas Dahrén

Kopiera DNA med hjälp av PCR-metoden. Niklas Dahrén Kopiera DNA med hjälp av PCR-metoden Niklas Dahrén Först lite allmän kunskap om kromosomer, DNA, gener etc. Varje kromosom består av en lång DNAmolekyl som är lindad runt histoner En gen är en liten del

Läs mer

Totalt finns det alltså 20 individer i denna population. Hälften, dvs 50%, av dem är svarta.

Totalt finns det alltså 20 individer i denna population. Hälften, dvs 50%, av dem är svarta. EVOLUTION Tänk dig att det på en liten ö i skärgården finns 10 st honor av den trevliga insekten långvingad muslus. Fem av dessa är gula med svarta fläckar och fem är helsvarta. Det är samma art, bara

Läs mer

Coatest SP Factor VIII 82 4086 63 Swedish revision 12/2004

Coatest SP Factor VIII 82 4086 63 Swedish revision 12/2004 AVSETT ÄNDAMÅL Kitet är avsett för fotometrisk bestämning av faktor VIII-aktivitet i plasma, antikoagulerad med citrat vid diagnostisering av FVIII-brist eller för monotorering av patienter i substitutionsterapi

Läs mer

Laboration DNA. Datum:16/11 20/ Labgrupp: 11 Laboranter: Johanna Olsson & Kent Johansson

Laboration DNA. Datum:16/11 20/ Labgrupp: 11 Laboranter: Johanna Olsson & Kent Johansson Laboration DNA Datum:16/11 20/11 2015 Labgrupp: 11 Laboranter: Johanna Olsson & Kent Johansson Material och metod Materiallista hänvisas till labhandledning s.3 (BIMA15 ht 2015, Lab III: DNA.) Uppsamling

Läs mer

Johan Nordgren, Andreas Matussek, Ann Mattsson, Lennart Svensson, Per-Eric Lindgren Division of Medical Microbiology/Molecular Virology Department of

Johan Nordgren, Andreas Matussek, Ann Mattsson, Lennart Svensson, Per-Eric Lindgren Division of Medical Microbiology/Molecular Virology Department of Johan Nordgren, Andreas Matussek, Ann Mattsson, Lennart Svensson, Per-Eric Lindgren Division of Medical Microbiology/Molecular Virology Department of Clinical and Experimental Medicine Vinterkräksjukan

Läs mer

Cellcykel/Celldöd. Laborationsrapport 20/2-14. Basgrupp 1

Cellcykel/Celldöd. Laborationsrapport 20/2-14. Basgrupp 1 Cellcykel/Celldöd Laborationsrapport 20/2-14 Basgrupp 1 Louise Andersson Alexander Barhebreus Pontus Boberg Amanda Dahl Simon Ingves Christina Larsson Kajsa Lethin Thea Wennman Syfte Se skillnad på hur

Läs mer

Framtida tekniker MLPA (Multiplex Ligation Probe Amplification) med tillämpning inom Talassemi. Dick Nelson Klinisk kemi, Labmedicin Skåne

Framtida tekniker MLPA (Multiplex Ligation Probe Amplification) med tillämpning inom Talassemi. Dick Nelson Klinisk kemi, Labmedicin Skåne Framtida tekniker MLPA (Multiplex Ligation Probe Amplification) med tillämpning inom Talassemi. Dick Nelson Klinisk kemi, Labmedicin Skåne α-talassemi 4 genotyper Wild type αα / αα - - α + -talassemi α

Läs mer

Den långa vägen till den korta ärmen. Handhygien och klinikkläder förr och nu. Jana Johansson Huggare

Den långa vägen till den korta ärmen. Handhygien och klinikkläder förr och nu. Jana Johansson Huggare Den långa vägen till den korta ärmen. Handhygien och klinikkläder förr och nu. Pieter Brueghel. The extraction of the stones of madness, 1556 57. Jana Johansson Huggare Jana Johansson Huggare 19 april

Läs mer

NUKLEINSYRORNAS UPPBYGGNAD: Två olika nukleinsyror: DNA deoxyribonukleinsyra RNA ribonukleinsyra

NUKLEINSYRORNAS UPPBYGGNAD: Två olika nukleinsyror: DNA deoxyribonukleinsyra RNA ribonukleinsyra NUKLEINSYRORNAS UPPBYGGNAD: Två olika nukleinsyror: DNA deoxyribonukleinsyra RNA ribonukleinsyra Monomererna som bygger upp nukleinsyrorna kallas NUKLEOTIDER. En nukleotid består av tre delar: en kvävebas

Läs mer

BASÅRET KEMI B BIOKEMI VT 2012. GENETISK INFORMATION 191-210 (sid. 157-177)

BASÅRET KEMI B BIOKEMI VT 2012. GENETISK INFORMATION 191-210 (sid. 157-177) BASÅRET KEMI B BIOKEMI GENETISK INFORMATION 191-210 (sid. 157-177) DNA/RNA, Transkription, Translation VAR I CELLEN SKER DETTA? Replikation - kopiering av DNA, sker i cellkärnan Transkription - avläsa

Läs mer

KOL en folksjukdom PRESSMATERIAL

KOL en folksjukdom PRESSMATERIAL KOL en folksjukdom Kroniskt obstruktiv lungsjukdom (KOL) är en inflammatorisk luftrörs- och lungsjukdom som ger en successivt försämrad lungfunktion och på sikt obotliga lungskador. KOL är en folksjukdom

Läs mer

ORDLISTA HEPATIT C (HCV)

ORDLISTA HEPATIT C (HCV) ORDLISTA HEPATIT C (HCV) Blodsmitta (blodburen sjukdom) Hepatit C är en blodburen sjukdom, det vill säga en sjukdom som överförs via blodsmitta. Vid andra virala sjukdomar, så som hepatit B eller HIV,

Läs mer

Klamydia ökar: Kan vi göra något bättre?

Klamydia ökar: Kan vi göra något bättre? Klamydia ökar: Kan vi göra något bättre? Björn Herrmann Klinisk mikrobiologi, Akademiska sjukhuset, Uppsala C. trachomatis i Sverige 1991-2011 Smittsk.lagen 1988 Ungd.mottagn Provtagn ökar AIDS DNA diagnostik

Läs mer

Denna pdf-fil är nedladdad från Illustrerad Vetenskaps webbplats (www.illvet.com) och får ej lämnas vidare till tredjepart.

Denna pdf-fil är nedladdad från Illustrerad Vetenskaps webbplats (www.illvet.com) och får ej lämnas vidare till tredjepart. Käre användare! Denna pdf-fil är nedladdad från Illustrerad Vetenskaps webbplats (www.illvet.com) och får ej lämnas vidare till tredjepart. Av hänsyn till copyright innehåller den inga foton. Med vänlig

Läs mer

DUGGA Molekylärbiologi T2 / VT p (G = 25 p)

DUGGA Molekylärbiologi T2 / VT p (G = 25 p) KORTSVARSFRÅGOR 1. Restriktionsenzymet BamHI klyver sekvensen 5 -G*GATCC-3 och lämnar 4 basers 5' överhäng. Rita upp det längsta DNA-fragmentet som bildas efter klyvning av nedanstående given sekvens med

Läs mer

Liv & Hälsa tand. December 2009

Liv & Hälsa tand. December 2009 Liv & Hälsa tand December 9 Jörgen Torstensson Tandvårdsenheten Landstinget Sörmland Gunnar Ekbäck Hälsokansliet Landstinget Örebro 2 Innehållsförteckning Inledning... 4 Allmänt om tandhälsa... 5 Undersökningen

Läs mer

JANINA WARENHOLT Molekylär patologi LUND

JANINA WARENHOLT Molekylär patologi LUND MPCR Multiplex Polymerase Chain Reaktion JANINA WARENHOLT Molekylär patologi LUND Vad är multiplex PCR Variant av PCR Möjliggör samtidigt att amplifiera (masskopiera) många målsekvenser i en enda reaktion.

Läs mer

DNA-ordlista. Amplifiera: Att kopiera och på så sätt mångfaldiga en DNA-sekvens med hjälp av PCR.

DNA-ordlista. Amplifiera: Att kopiera och på så sätt mångfaldiga en DNA-sekvens med hjälp av PCR. DNA-ordlista Alignment: Att placera DNA-sekvenser intill varandra. Detta gör att man kan urskilja var och hur mycket de skiljer sig från varandra, vilket är ett av de mest grundläggande sätten att analysera

Läs mer

Enbrel ger en bestående förbättring av livskvaliteten för patienter med psoriasis

Enbrel ger en bestående förbättring av livskvaliteten för patienter med psoriasis P R E S S M E D D E L A N D E FÖR OMEDELBAR PUBLICERING/ DEN 23 SEPTEMBER Enbrel ger en bestående förbättring av livskvaliteten för patienter med psoriasis Ett års behandling med läkemedlet Enbrel gav

Läs mer

Nobelförsamlingen vid Karolinska Institutet har idag beslutat att tilldela. Nobelpriset i fysiologi eller medicin år 2015

Nobelförsamlingen vid Karolinska Institutet har idag beslutat att tilldela. Nobelpriset i fysiologi eller medicin år 2015 Nobelförsamlingen vid Karolinska Institutet har idag beslutat att tilldela Nobelpriset i fysiologi eller medicin år 2015 med ena hälften gemensamt till William C. Campbell och Satoshi Ōmura för deras upptäckter

Läs mer

Nytt fosterprov utmanar

Nytt fosterprov utmanar Forskning & Framsteg Nr 12/2010 s. 14-16 http://www.fof.se/tidning/2011/1/nytt-fosterprov-utmanar Nytt fosterprov utmanar AV PER SNAPRUD UR F&F 1/2011. Ett enkelt blodprov från en gravid kvinna kan avslöja

Läs mer

Arytmogen högerkammarkardiomyopati

Arytmogen högerkammarkardiomyopati Centrum för kardiovaskulär genetik Norrlands universitetssjukhus Information till patienter och anhöriga Arytmogen högerkammarkardiomyopati Den här informationen riktar sig till dig som har sjukdomen arytmogen

Läs mer

Kronisk fästingburen borrelios

Kronisk fästingburen borrelios Kronisk fästingburen borrelios Sven Bergström Professor i mikrobiologi I denna presentation kommer jag att redogöra för ihärdiga infektioner som är relaterade till Borrelia-bakterier, dvs. kronisk fästingburen

Läs mer

Personnummer. DUGGA Molekylärbiologi T3 / HT p (G = 24 p)

Personnummer. DUGGA Molekylärbiologi T3 / HT p (G = 24 p) KORTSVARSFRÅGOR 1. Restriktionsenzymet HindIII klyver sekvensen 5 -AAGCTT-3 och lämnar ett fyra basers 5 -överhäng. Rita ut hur DNA-ändarna ser ut på ett fragment som klyvts med HindIII. (2p) SV: 5 -A

Läs mer

Vad är Klinisk forskning

Vad är Klinisk forskning Vad är Klinisk forskning Geografiskt nära sjukhusmiljöer och patienter Sjukdomsproblem eller förlopp i fokus Läkare/vårdpersonal inblandade Nyttan för patienterna tydlig Utmaningen: + Laboratorium Patienter

Läs mer

Instuderingsfrågor avsnitten Molekylär genetik och Rekombinant DNA tekniker, MCB

Instuderingsfrågor avsnitten Molekylär genetik och Rekombinant DNA tekniker, MCB Instuderingsfrågor avsnitten Molekylär genetik och Rekombinant DNA tekniker, MCB Molekylärgenetikdelen 1. Vad är DNA? 2. Vad heter byggstenarna i DNA? 3. Vad är RNA? 4. Vad är en bas, nukleosid, nukleotid

Läs mer

Mångfaldigande av mänskligt mitokondrie-dna

Mångfaldigande av mänskligt mitokondrie-dna John Schollar och Andy Harrison NCBE, The University of Reading Mångfaldigande av mänskligt mitokondrie-dna Syfte Med denna procedur kan du mångfaldiga ett 460 baspar långt stycke DNA, som finns i kontrollregion

Läs mer

Fakta om talassemi sjukdom och behandling

Fakta om talassemi sjukdom och behandling Fakta om talassemi sjukdom och behandling Talassemi Talassemi är en ärftlig kronisk form av blodbrist (anemi). Sjukdomen är ovanlig i Sverige, mellan 40 och 50 personer beräknas ha en svår symtomgivande

Läs mer

DNA-LCT -13910 C>T, Taqman alleldiskriminering, Malmö

DNA-LCT -13910 C>T, Taqman alleldiskriminering, Malmö 1(5) DNA-LCT -13910 C>T, Taqman alleldiskriminering, Malmö Bakgrund, indikation och tolkning Enzymet laktas finns i tunntarmens enterocyter och möjliggör digestionen av diasackariden laktos/mjölksocker

Läs mer

Analys av nukleinsyra. Molekylärbiologisk metodik T3 ht 11 Märit Karls

Analys av nukleinsyra. Molekylärbiologisk metodik T3 ht 11 Märit Karls Analys av nukleinsyra Molekylärbiologisk metodik T3 ht 11 Märit Karls Studietips Detta kompendium är INTE en lärobok. Det är inte meningen att man skall kunna läsa kompendiet och förstå innehållet. Ni

Läs mer

Rening av proteiner: hur och varför?

Rening av proteiner: hur och varför? Rening av proteiner: hur och varför? (och lite biologiska grunder) Joakim Norbeck! norbeck@chalmers.se! Grunder! Plasmider! Protein-rening! Detektion!!!!! Mest relevanta sidor i "Cell" är 510-518 & 532-552!

Läs mer

C V C. Bruksanvisning till Biofortuna SSPGo TM HLA Wipe Test BF-40-01. Revision 3. Juli 2014

C V C. Bruksanvisning till Biofortuna SSPGo TM HLA Wipe Test BF-40-01. Revision 3. Juli 2014 Dot159v1 Instructions for Use for Biofortuna SSPGo TM HLA Wipe Test BF-40-01 Sidan 1 av 8 Bruksanvisning till Biofortuna SSPGo TM HLA Wipe Test BF-40-01 Revision 3 Juli 2014 Dot159v1 Instructions for Use

Läs mer

LPP Nervsystemet, hormoner och genetik

LPP Nervsystemet, hormoner och genetik LPP Nervsystemet, hormoner och genetik Det är bara hormonerna och han är full av hormoner är två vanliga uttryck med ordet hormon, men vad är egentligen hormoner och hur påverkar de kroppen? Vi har ett

Läs mer

Jordprover. Ta lite jord från vardera provet och placera i små högar på den runda plastskålen.

Jordprover. Ta lite jord från vardera provet och placera i små högar på den runda plastskålen. Jordprover Undersök de olika jordproverna i stereomikroskopet. Ta lite jord från vardera provet och placera i små högar på den runda plastskålen. Placera skålen under stereomikroskopet. Ställ in 2x förstoring

Läs mer

Område: Ekologi. Innehåll: Examinationsform: Livets mångfald (sid. 14-31) I atomernas värld (sid.32-45) Ekologi (sid. 46-77)

Område: Ekologi. Innehåll: Examinationsform: Livets mångfald (sid. 14-31) I atomernas värld (sid.32-45) Ekologi (sid. 46-77) Område: Ekologi Innehåll: Livets mångfald (sid. 14-31) I atomernas värld (sid.32-45) Ekologi (sid. 46-77) Undervisningen i kursen ska behandla följande centrala innehåll: Frågor om hållbar utveckling:

Läs mer

FIGURE 1. Portrait of Edward Francis. Dr. Francis (1872 1957) was an early and important disease researcher who gave tularemia its name, after Tulare

FIGURE 1. Portrait of Edward Francis. Dr. Francis (1872 1957) was an early and important disease researcher who gave tularemia its name, after Tulare HARPEST FIGURE 1. Portrait of Edward Francis. Dr. Francis (1872 1957) was an early and important disease researcher who gave tularemia its name, after Tulare County, California, Unites States. FIGURE 2.

Läs mer

Framställning av M1-protein med hjälp av E. coli-bakterier

Framställning av M1-protein med hjälp av E. coli-bakterier Framställning av M1-protein med hjälp av E. coli-bakterier Serhat Aktay SerhatAktay@gmail.com Sebastian Valenzuela Sebastian.Valenzuela@live.se Forskningsmentor Robert Daniels, Forskarassistent Institutionen

Läs mer

Våga prata om dina erektionsproblem

Våga prata om dina erektionsproblem Våga prata om dina erektionsproblem Sexlivet är en viktig del för närheten och samhörigheten i en parrelation. Men för många män, och kanske också för dig, är ett vitalt sexliv inte någon självklarhet

Läs mer

Varför vill vi veta något om vilka patogener som finns i avloppsvattnet och hur gör vi?

Varför vill vi veta något om vilka patogener som finns i avloppsvattnet och hur gör vi? Varför vill vi veta något om vilka patogener som finns i avloppsvattnet och hur gör vi? Per-Eric Lindgren Inst för klinisk och experimentell medicin Linköpings universitet Linköping Grupper av humanpatogener

Läs mer

PARTNER-studien. Du har tillfrågats om att delta i den här studien eftersom du är den HIV-negativa partnern i förhållandet.

PARTNER-studien. Du har tillfrågats om att delta i den här studien eftersom du är den HIV-negativa partnern i förhållandet. Deltagarinformation och informerat samtycke för den HIV-negativa partnern PARTNER-studien PARTNER-studien är en studie som riktar sig till par där: (i) den ena partnern är HIV-positiv och den andra är

Läs mer

Malariabekämpning i ett genusperspektiv Marita Troye-Blomberg

Malariabekämpning i ett genusperspektiv Marita Troye-Blomberg Malariabekämpning i ett genusperspektiv Marita Troye-Blomberg Marita.Troye-Blomberg@wgi.su.se Upplägg Malaria a) Parasiten b) Klinik c) Behandling d) Immunitet e) Genus och kön f) Malaria och graviditet

Läs mer

FilmArray - helautomatiserad multiplex likvordiagnostik

FilmArray - helautomatiserad multiplex likvordiagnostik FilmArray - helautomatiserad multiplex likvordiagnostik Sara Thulin Hedberg, Molekylärbiolog, PhD David Nestor, Sara Thulin Hedberg, Paula Mölling & Martin Sundqvist Laboratoriemedicinska Länskliniken,

Läs mer

Ansökningsformulär FoU-medel för år 2008

Ansökningsformulär FoU-medel för år 2008 FoU-centrum Namn: Andreas Mårtensson Ansökningsformulär FoU-medel för år 2008 Projekttitel: PCR genotypning av Plasmodium falciparum malaria i kliniska läkemedelsstudier Sammanfattning av sökt forskningsprojekt:

Läs mer

Vinterkräksjuka. Säsongen 2010. Fredrik Idving Hygiensjuksköterska

Vinterkräksjuka. Säsongen 2010. Fredrik Idving Hygiensjuksköterska Vinterkräksjuka Säsongen 2010 Fredrik Idving Hygiensjuksköterska Allmänt om vinterkräksjuka Årets säsong Historik Hur vi hanterar ett utbrott Virus som orsakar magsjuka Calicivirus Norovirus, vinterkräksjuka

Läs mer

Bakgrund. Bomullsmögel- ny metod ger ökad precision och förbättrad riskbedömning. Bomullsmögel är en sjukdom som vissa år

Bakgrund. Bomullsmögel- ny metod ger ökad precision och förbättrad riskbedömning. Bomullsmögel är en sjukdom som vissa år Bomullsmögel- ny metod ger ökad precision och förbättrad riskbedömning Rapsarealen i Sverige 2008 Ann-Charlotte Wallenhammar, 2 Charlotta Almquist, Anna Redner och 3 Anki Sjöberg HS Konsult AB, Örebro

Läs mer

Penicillinallergi hos barn

Penicillinallergi hos barn Penicillinallergi hos barn Misstänkt betalaktamöverkänslighet Dan Gustafsson Allergicentrum ÖLL Strategi ACÖ skall kännetecknas av hög kompetens i allergi frågor vad avser såväl hälsofrämjande, preventiva

Läs mer

Selektion av resistenta bakterier vid väldigt låga koncentrationer av antibiotika.

Selektion av resistenta bakterier vid väldigt låga koncentrationer av antibiotika. Selektion av resistenta bakterier vid väldigt låga koncentrationer av antibiotika. Linus Sandegren Uppsala Universitet Inst. för Medicinsk Biokemi och Mikrobiologi linus.sandegren@imbim.uu.se Hur påverkas

Läs mer

Malaria. En jämförande studie om diagnosticeringsmetoder. Vilken metod passar bäst utifrån miljö, samhälle och framtid? Högskolan Kristianstad

Malaria. En jämförande studie om diagnosticeringsmetoder. Vilken metod passar bäst utifrån miljö, samhälle och framtid? Högskolan Kristianstad Högskolan Kristianstad Malaria En jämförande studie om diagnosticeringsmetoder. Vilken metod passar bäst utifrån miljö, samhälle och framtid? Författare: Alice Nilsson Vetenskapliga teorier och metoder

Läs mer

Donation av blodstamceller Informationsbroschyr till donator 18 år

Donation av blodstamceller Informationsbroschyr till donator 18 år Donation av blodstamceller Informationsbroschyr till donator 18 år Giltigt i 2 år från 2015-04-24 Sida 1 av 6 Bakgrund De blodbildande stamcellerna finns framför allt i benmärgen. En liten mängd cirkulerar

Läs mer

Kontakta din läkare. sanofi-aventis Box 14142, 167 14 BROMMA. Tel 08-634 50 00, infoavd@sanofi-aventis.com, www.sanofi-aventis.se

Kontakta din läkare. sanofi-aventis Box 14142, 167 14 BROMMA. Tel 08-634 50 00, infoavd@sanofi-aventis.com, www.sanofi-aventis.se Kontakta din läkare Kontakta genast din läkare om du drabbas av något av nedanstående symtom medan du behandlas med JEVTANA. feber, dvs en kroppstemperatur på 38 C eller högre diarré (t.ex. om du har lös

Läs mer

Metodutveckling för detektion av jordbundna sjukdomar för optimering av platsspecifik produktion av vete, ärt och oljeväxter

Metodutveckling för detektion av jordbundna sjukdomar för optimering av platsspecifik produktion av vete, ärt och oljeväxter Metodutveckling för detektion av jordbundna sjukdomar för optimering av platsspecifik produktion av vete, ärt och oljeväxter Ann-Charlotte Wallenhammar 1, Charlotta Almquist 2,3 and Anders Jonsson 2,3

Läs mer

Landstingsstyrelsens förslag till beslut

Landstingsstyrelsens förslag till beslut FÖRSLAG 2009:103 1 (8) Landstingsstyrelsens förslag till beslut Motion 2008:17 av Inger Ros (S) om start av en informationskampanj i syfte att minska spridningen av klamydia Föredragande landstingsråd:

Läs mer

Pandemisk influensa A(H1N1; AH1p) 2009. Annika Linde Statsepidemiolog Smittskyddsinstitutet

Pandemisk influensa A(H1N1; AH1p) 2009. Annika Linde Statsepidemiolog Smittskyddsinstitutet Pandemisk influensa A(H1N1; AH1p) 2009 Annika Linde Statsepidemiolog Smittskyddsinstitutet H, N Ibland anpassas ett andvirus och börjar spridas mellan andra arter Influensavirus Förekommer i 3 typer A,

Läs mer

Detektion av Endosymbionter hos insekter via PCR, kloning och sekvensering

Detektion av Endosymbionter hos insekter via PCR, kloning och sekvensering MÄLARDALENS HÖGSKOLA Akademin för hållbar samhälls- och teknikutveckling Detektion av Endosymbionter hos insekter via PCR, kloning och sekvensering Shaheen Rahman Examensarbete, 15 hp Handledare: Carl

Läs mer

Kopparsmälta från Hagby

Kopparsmälta från Hagby UV GAL PM 2013:02 GEOARKEOLOGISK UNDERSÖKNING Kopparsmälta från Hagby Kemisk analys av en smälta Småland, Kalmar kn, Hagby sn, Lokal 29, RAÄ 146 Lena Grandin Innehåll Sammanfattning... 5 Abstract... 5

Läs mer

En bioinformatisk genjakt

En bioinformatisk genjakt En bioinformatisk genjakt Efter en ide från: CUSMOBIO, Milano, Italien. Hur man kan söka i databaser efter information om en gen som kan ge ökad risk för bröstcacer. Bakgrund Människor utan symptom men

Läs mer

Figur 1. En amerikansk soldat demonstrerar handbesprutning med DDT (PHIL 2007).

Figur 1. En amerikansk soldat demonstrerar handbesprutning med DDT (PHIL 2007). DDT används fortfarande. Varför? Ingrid Asker Populärvetenskaplig sammanfattning av Självständigt arbete i biologi 2011 Institutionen för biologisk grundutbildning, Uppsala universitet Miljoner människor

Läs mer

FRÅGOR OCH SVAR OM ZYTIGA (abiraterone) 2011 09 12

FRÅGOR OCH SVAR OM ZYTIGA (abiraterone) 2011 09 12 FRÅGOR OCH SVAR OM ZYTIGA (abiraterone) 2011 09 12 FÖR EXTERN ANVÄNDNING (F&S om ZYTIGA är endast avsedd för media) Vad är prostatacancer? Prostatacancer uppstår när det bildas cancerceller i prostatans

Läs mer