Snabb standardiserad resistensbestämning

Transkript

1 nabb standardiserad resistensbestämning Martin undqvist Emma Jonasson Gunilla Cederbrant Erika Matuschek Gunnar Kahlmeter Dept of Clinical Microbiology Växjö

2 Varför? Ökande resistens Felaktig behandling leder till ökad risk för död nabbare turn-over på laboratoriet Nya metoder (MALDI-TOF) ger möjlighet till snabb artbestämning

3 Utveckling av standardiserad resistensbestämning på -h 1) Utveckling av metod baserad på MH-F agar och inkubation i 5% CO + nabb tillväxt även av Pnc och Betahemolytiska strept. - Kräver separata brytpunkter - vårare i automation ) Utveckling av metod baserad på MH och inkubation i luft (EUOTA-projektet) + Bra tillväxt av de viktigaste patogenerna + Ger ev möjlighet att använda existerande brytpunkter + Lättare att automatisera - Erbjuder inte en metod för Pnc eller betahemolytiska strept.

4 Vad behövde vi göra? kapa QC-gränser Escherichia coli ATCC 59, Enterococcus faecalis ATCC 9, taphylococcus aureus ATCC 913 and Pseudomonas aeruginosa ATCC 753 to 7 test per stam target value (median) och range (min-max) beräknad

5 esults part (ATCC) Escherichia coli ATCC 59 Eurostar (h) EUCAT (1h) (n=/) Target ange Target ange Cefotaxime Ciprofloxacin Meropenem Ceftazidime Piperacillin/tazobactam Trimethoprim Nitrofurantoin Tobramycin Gentamicin Enterococcus faecalis ATCC 9 Eurostar (h) EUCAT (1h) (n=55/5) Target ange Target ange Ampicillin Vancomycin Gentamicin 3* Linezolid Nitrofurantoin * 39/ tested isolates

6 esults part (ATCC) Ps. aerugionosa ATCC 913 (n=/) Eurostar (h) EUCAT (1h) Target ange Target ange Piperacillin/tazobactam Tobramycin Meropenem Ceftazidime Imipenem Ciprofloxacin Gentamicin taphylococcus aureus ATCC 913 (n=/) Eurostar (h) EUCAT (1h) Target ange Target ange Clindamycin Erythromycin Linezolid Norfloxacin Cefoxitin

7 Vad behöver vi göra? kapa QC-gränser Escherichia coli ATCC 59, Enterococcus faecalis ATCC 9, taphylococcus aureus ATCC 913 and Pseudomonas aeruginosa ATCC 753 to 7 test per stam target value (median) och range (min-max) beräknad kapa vildtypsdistributioner (+ resistenta isolat) Kliniskt betydelsefulla antibiotika 5 välkarakteriserade E. coli, E. faecalis /E. faecium,.aureus och P.aeruginosa Jämföra både I kategorisering och zon-zon korrelat med EUCAT metoden (-h incubation).

8 E. coli and cefotaxime 5µg 1 h Cefotaxime 5 µg, hours incubation E. coli, 55 clinical isolates I 1 Cefotaxime 5 µg, hours incubation E. coli, 55 clinical isolates 1h CBP 1 <1 h I

9 1 3 E. coli and cefotaxime 5µg Cefotaxime 5 µg, hours incubation E. coli, 55 clinical isolates 1 I 1h CBP 1 <1

10 E. coli and ceftazidime µg h Ceftazidime µg, hours incubation E. coli, 55 clinical isolates I Ceftazidime µg, h incubation E. coli, 55 clinical isolates 1h CBP <19 h I

11 E. coli and piperacillin-tazobactam Piperacillin-tazobaktam 3 µg, hours incubation E. coli, 5 clinical isolates 1 h I Inhibition zone diamter (mm) Piperacillin-tazobaktam 3 µg, hours incubation E. coli, 5 clinical isolates 1 1h CBP 1 <15 h I

12 1 3 1 Piperacillin-tazobaktam 3 µg, hours incubation E. coli, 5 clinical isolates I 1h CBP 1 <15

13 Vad behöver vi göra? kapa QC-gränser Escherichia coli ATCC 59, Enterococcus faecalis ATCC 9, taphylococcus aureus ATCC 913 and Pseudomonas aeruginosa ATCC 753 to 7 test per stam target value (median) och range (min-max) beräknad kapa vildtypsdistributioner (med enstaka resistenta isolat) Kliniskt betydelsefulla antibiotika 5 välkarakteriserade E. coli, E. faecalis /E. faecium,.aureus och P.aeruginosa Jämföra både I kategorisering och zon-zon korrelat med EUCAT metoden (-h incubation). Undersöka särskilda resistensmekanismer

14 1 3 5.aureus och cefoxitin 3µg 5 Cefoxitin 3 µg, hours incubation. aureus, 5 clinical isolates h CBP <

15 1 1 E. faecalis/faecium och gentamicin 3 µg Gentamicin 3 µg, h incubation Enterococcus, 7 isolates h Orange = HLA HLA Gentamicin 3 µg, h incubation Enterococcus, 7 isolates HLA mm 1h h HLA

16 1 1 E. faecalis/faecium and vancomycin 3 Vankomycin 5 µg, h incubation Enterococcus, isolates Vancomycin 5 µg, h incubation Enterococcus, isolates 3 5 1h CBP < 15 5 Inhibition zone diametre (mm)

17 h vs 1 h incubation Escherichia coli ATCC 59 after h incubation. Escherichia coli ATCC 59 and 1h incubation.

18 lutsats Det är möjligt att standardisera resistensbestämning på h (E.coli och Enterokocker) eller h (.aureus och P.aeruginosa) för de flesta antibiotika Vissa antibiotika/resistensmekanismer kommer inte att passa Fler specifika resistenskombinationer ska testas. törre kollektion av konsekutiva kliniska isolat ska testas

19 Tack